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DNA片段扩增及电泳鉴定实验改进

目录

DNA片段扩增及电泳鉴定实验改进（1）．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

一、内容概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

1.1实验目的与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

1.2实验原理简介．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.3实验材料与方法概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5

二、实验准备．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6

2.1样品制备．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6

2.2试剂与仪器准备．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7

2.3实验室安全与防护措施．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8

三、DNA片段扩增技术优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10

3.1引物设计与选择．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11

3.2核酸提取与纯化方法改进．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12

3.3扩增反应条件优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14

3.4多聚酶链反应技术升级．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15

四、电泳鉴定方法改进．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17

4.1电泳槽与凝胶选择．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17

4.2分子量标准品制备．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19

4.3电泳参数优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20

4.4结果分析方法改进．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22

五、实验结果与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23

5.1扩增产物检测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24

5.2电泳图谱分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25

5.3数据统计与处理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26

5.4结果讨论与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28

六、实验注意事项与问题解决．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29

6.1实验过程中常见问题及预防措施．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30

6.2实验操作失误案例分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31

6.3实验结果偏差原因探究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32

6.4改进措施与建议．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33

七、结论与展望．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35

7.1实验主要发现总结．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35

7.2技术创新点提炼．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．36

7.3未来研究方向展望．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．38

DNA片段扩增及电泳鉴定实验改进（2）．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39

一、内容概要．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39

二、实验原理与目的．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39

三、实验材料与设备．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．41

3.1模板DNA的制备．．．．．．．．．．．．．．．．．