白英;化学成分;抗肿瘤活性;生物碱;绿原酸;药物动力学.docx

沈阳药科大学硕士学位论文第三章白英质量控制方法研究

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选用327nm波长检测。正交实验结果表明：随着提取时间的增加绿原酸的含量呈减小趋势，说明绿原酸性质不稳定，易分解，提取时间不应过长。

据文献报道，绿原酸、咖啡酸有显著的抗菌、抗病毒及抗癌活性[68-69],本文以绿原酸、咖啡酸为指标，对上海、江西，湖南等20个产地白英中绿原酸、咖啡酸的含量进行测定，为建立白英的质量标准提供科学依据。从表3-6可看出白英中绿原酸的含量明显高于咖啡酸。不同产地的白英中，绿原酸和咖啡酸含量存在较大差异，可能与不同生长条件有关。

3.2RP-HPLC-UV法测定白英中士的宁含量分析方法的建立

3.2.1实验材料仪器

LC-6A高效液相色谱仪SPD-6A紫外检测器

ANASTAR色谱工作站TG332A分析天平

KQ-100型超声仪

88B高速粉碎机

RE-52AA型旋转蒸发器循环水式多用真空泵

试剂，药品

日本SHIMADZU

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天津奥特塞恩斯仪器有限公司湘仪天平仪器厂

昆山市超声波仪器有限公司

浙江省瑞安市春海药材器械厂上海亚荣生化仪器厂

郑州长城科工贸有限公司

乙腈(色谱纯)

甲醇(分析纯)

水(娃哈哈饮用纯净水)士的宁标准品

白英药材

山东禹王实业有限公司禹城化工厂

山东禹王实业有限公司禹城化工厂杭州娃哈哈集团有限公司

中国药品生物制品检定所

10个产地白英药材购于各产地，经由沈阳药科大学中药学院孙启时教授鉴定为SolanumlyratumThunb.。

3.2.2实验方法

对照品溶液的制备

取士的宁对照品5.0mg,精密称定，置50mL容量瓶中，用适量甲醇溶解并稀释至刻度摇匀，即得0.1mgmL1的士的宁储备液，4℃备用。

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供试品溶液的制备

取白英干燥药材细粉(过40目筛)约10g,精密称定。置于500mL圆底烧瓶中，加入40mL浓氨水浸润1h,再加入80%甲醇200mL,80℃水浴下回流提取2次，每次1h,合并提取液，过滤并蒸干。残渣用适量80%甲醇溶解，转移至25mL容量瓶中，用80%甲醇定容，摇匀后用微孔滤膜过滤，即得。

色谱条件与系统适用性试验

色谱柱为Diamonsil-C18(250mm×4.6mm,5μm)柱；流动相为乙腈-10mmoL·L1磷酸二氢钾(8:92,vv,磷酸调pH至2.5);检测波长254nm;柱温35℃;流速1.0mL·min1;进样量20μL。理论板数按士的宁计，不低于2000。士的宁与其它组分峰的分离度大于1.5,拖尾因子在0.95～1.05之间。该色谱条件下的典型色谱图见图3-2,1号峰为士的宁色谱峰。

v/mvv/mv

v/mv

v/mv

t/mint/min

t/min

Fig.3-2HPLCchromatogramsofstrychninereferencesubstances(A)andsample(1strychnine)

图3-2士的宁对照品(A)及样品(B)HPLC图(1为士的宁峰)

提取溶剂的选择

取白英干燥药材细粉(过40目筛)约10g,精密称定。置于500mL圆底烧瓶中，加入40mL浓氨水浸润1h,分别用200mL甲醇、乙醇、氯仿作为提取溶剂按上述方法制备供试品溶液。另取一份，用200mL甲醇提取，除不加氨水浸润外，其他过程同供试品溶液的制备。测定结果见表3-7。

Table3-7Thecontentofstrychninewithdifferentextractionsolvents

表3-7不同提取溶剂所得士的宁的含量

Extractionsolvent

c(strychnine)(μg·g)

Ethanol(ammoniumwateradded)

8.11

Trichloromethane(ammoniumwateradded)

1.77

methanol(ammoniumwateradded)

21.59

methanol(withoutammoniumwater)

7.29

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