TYNRZ 011-2024 咖啡生豆氨基酸总量测定分光光度法.docx

ICS67.140.20

CCSB35

团 体 标 准

T/YNRZ011—2024

咖啡生豆氨基酸总量测定分光光度法

TheDeterminationofTotalAminoAcidsinCoffeebeansWithSpectrophotometry

2024-05-07发布 2024-05-22实施

云南省热带作物学会??发布

T/YNRZ011

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T/YNRZ011

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目 录

前言 II

范围 1

规范性引用文件 1

术语和定义 1

原理 1

仪器和器皿 1

试剂和溶液 1

分析步骤 2

结果计算 2

检测报告 3

I

前 言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由云南省德宏热带农业科学研究所提出。

本文件由云南省热带作物学会归口。

本文件起草单位：云南省德宏热带农业科学研究所、大理大学。

本文件主要起草人：陈玉芹、赵成法、李庆聪、尹红星、戴余波、王应清、刘小琼、胡永亮、黄家卫。

II

咖啡生豆氨基酸总量测定分光光度法

范围

本文件规定了咖啡生豆中氨基酸总量测定的术语和定义，原理、仪器和器皿，试剂和溶液、分析步骤，结果计算和检测报告的方法。

本文件适用于咖啡生豆中氨基酸总量的测定。

规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB5009.124食品中氨基酸的测定GB/T18007咖啡及其制品术语NY/T1518袋装生咖啡取样

术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

咖啡生豆

咖啡生豆即未烘焙过的咖啡豆，按GB/T18007的5.6规定执行

茚三酮比色法

按GB5009.124规定执行

原理

氨基酸在pH8.0的条件下与茚三酮反应，形成紫色络合物，用分光光度法在570nm的波长下测定其含量。

仪器和器皿

分析天平：感量0.0001g。

可见光分光光度仪。

安瓿瓶。

陶瓷蒸发皿。

比色管：磨口，50mL。

比色杯：1cm。

容量瓶：25mL、50mL、100mL、1000mL。

酒精喷灯。

研磨机或组织粉碎机。

试剂和溶液

除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯（AR），水为蒸馏水。

试剂

1

亮氨酸：纯度≥98%。

浓盐酸（HCl）：质量分数≥36%。

磷酸氢二钠（Na2HPO4?12H2O）。

磷酸二氢钾（KH2PO4）。

茚三酮：纯度≥95%。

氯化亚锡（SnCl2?2H2O）。

溶液配制

6mol/L盐酸溶液：取500mL浓盐酸（6.1.2）加水稀释至1000mL，混匀。

pH8.0磷酸盐缓冲液配制

1/15mol/L磷酸氢二钠：称取11.9g十二水磷酸氢二钠（Na2HPO4?12H2O），加水溶解后定容至1000mL。

1/15mol/L磷酸二氢钾：称取经110℃烘干2小时的磷酸二氢钾（KH2PO4）0.908g，加水溶解后定容至100mL，摇匀备用。

取1/15mol/L磷酸氢二钠溶液（6.2.2.1）950mL和1/15mol/L磷酸二氢钾溶液

（6.2.2.2）50mL，混匀，该混合溶液pH为8.0。

2%茚三酮溶液配制

称取茚三酮（纯度≥95%）2g，加50mL水和80mg氯化亚锡（SnCl2?2H2O）搅拌均匀。分次加少量水溶解，放在暗处，静置一昼夜，过滤后加水定容至100mL容量瓶中，摇匀备用。

标准溶液配制

亮氨酸10mg/mL标准储备液：精确称量亮氨酸（纯度≥98%）0.25g，用蒸馏水溶解后，定量转入25mL容量瓶中，加水至标线，摇匀，此时标准储备液1mL含有10mg的亮氨酸。

亮氨酸标准系列工作溶液：精确移取0.50mL、1.00mL、1.50mL、2.00mL、2.50mL、

3.00mL标准储备液（6.2.4.1），分别加水定容至50mL容量瓶中，摇匀。该系列标准工作液1mL分别含有0.10mg、0.20mg、0.30mg、0.40mg、0.50mg、0.60mg亮氨酸。

分析步骤

样品制备

取样按照NY/T1518的规定执行，样品制备按照GB5009.124-2016中5.1的规定。

样品试液制备

称取试样100mg～200