重组DNA技术的基本工具（教学课件）高二生物（人教版2019选择性必修3）.pptx

第三章基因工程第1节重组DNA技术的基本工具【本节聚焦】1.重组DNA技术所需的三种基本工具是什么？它们的作用分别是什么？2.基因工程载体需要具备什么条件？

科技探索之路：基因工程的诞生和发展1944年艾弗里等人通过肺炎链球菌的转化实验，不仅证明了遗传物质是DNA，还证明了DNA可以在同种生物个体间转移。1961年尼伦伯格和马太破译了第一个编码氨基酸的密码子。截至1966年，64个密码子均被破译成功。1970年科学家在细菌中发现了第一个限制性内切核酸酶（简称限制酶）1972年，伯格首先在体外进行了DNA的改造，成功构建了第一个体外重组DNA分子。1982年，第一个基因工程药物-重组人胰岛素被批准上市。基因工程药物成为世界各国研究和投资开发的热点。1953年沃森和克里克建立DNA双螺旋结构模型并提出了遗传物质自我复制的假说。1967年，科学家发现，在细菌拟核DNA之外的质粒有自我复制能力，并可以在细菌细胞间转移。20世纪70年代初，多种限制酶、DNA连接酶和逆转录酶被相继发现。这些发现为DNA的切割、连接以及功能基因的获得创造了条件。1973年，科学家证明了质粒可以作为基因工程的载体，并实现了物种间的基因交流。至此，基因工程正式问世。1985年，穆里斯等人发明PCR,为获取目的基因提供了有效手段。

从社会中来番木瓜容易受番木瓜环斑病毒的侵袭。当番木瓜被这种病毒感染后，产量会大大下降。思考：如何培育出抵御番木瓜环斑病毒的木瓜呢?杂交育种？同种生物之间进行诱变育种？在原有基因上发生基因突变，产生新基因——等位基因不定向科学家通过精心设计，用“分子工具”培育出了转基因番木瓜那么，科学家究竟用到了哪些“分子工具”？这些“分子工具”各具有什么特征呢？

一、基因工程的概述1.基因工程的概念：指按照人们的愿望,进行严格的设计并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫作DNA重组技术。【归纳定义】工程别名：操作对象：操作水平：工程实质：DNA重组技术基因DNA分子水平基因重组

一、基因工程的概述2.图解“基因工程实质”转移A生物B生物萤火虫普通动植物发光基因

一、基因工程的概述【问题1】为什么不同生物的DNA分子能拼接起来？①DNA分子的基本组成单位相同，都是4种脱氧核苷酸；②空间结构相同，都是规则的双螺旋结构。③都遵循碱基互补配对原则脱氧核糖含氮碱基磷酸DNA平面结构DNA立体结构

一、基因工程的概述【问题2】为什么一种生物的基因可以在另一种生物细胞内表达？①基因是控制生物性状的独立遗传单位。②遗传信息的传递都遵循中心法则。③生物界共用一套遗传密码。相同的遗传信息在不同生物体内表达出相同的蛋白质。

一、基因工程的概述思考：DNA双螺旋的直径只有2nm,对如此微小的分子进行操作，是一项非常精细的工作，更需要专门的“分子工具”。“分子手术刀”准确切割DNA分子“分子缝合针”“分子运输车”将DNA片段连接起来将体外重组好的DNA分子导入受体细胞

二、限制性内切核酸酶——“分子手术刀”能识别的特定核苷酸序列，并使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。切割DNA分子的工具是限制性内切核酸酶，又称。限制酶1.来源：2.种类：主要来自原核生物数千种限制酶不是一种酶，而是一类酶。3.作用特点：专一性作用部位一般为4~8个或其他数量的核苷酸，最常见的为6个核苷酸。双链DNA分子

二、限制性内切核酸酶——“分子手术刀”【问题3】你能根据所掌握的知识，推测限制酶存在于原核生物中的主要作用是什么吗？原核生物容易受到自然界外源DNA的入侵，所以它在长期的进化过程中形成了套完善的防御机制。限制酶就是它的一种防御性工具。当外源DNA入侵时，它会利用限制酶来切割外源DNA，使之失效，以保证自身的安全。为什么限制酶不切割细菌本身的DNA分子？含某种限制酶的细菌的DNA分子不具备这种限制酶的识别序列，或者甲基化酶将甲基转移到了限制酶所识别序列的碱基上，使限制酶不能将其切开。

二、限制性内切核酸酶——“分子手术刀”1’2’3’4’5’G限制酶1’2’3’4’5’A磷酸二酯键TGCCGTAA5353

二、限制性内切核酸酶——“分子手术刀”4.识别序列EcoRⅠ5’…G-A-A-T-T-C…3’3’…C-T-T-A-A-G…5’SmaⅠ5’…C-C-C-G-G-G…3’3’…G-G-G-C-C-C…5’BamHⅠ5’…G-G-A-T-C-C…3’3’…C