《动物实验技术》课件——任务1：实验动物采血技术与方法.pptxVIP

血液检测是一种常见而重要的医疗诊断手段，可以帮助医生评估人体健康状况、诊断疾

病、监测疾病进展以及监控治疗效果等；

动物实验中，实验动物血液样本的采集与血液样本质量提升尤为重要。

人类血液样本检查实验动物

与人类一样，实验动物也有多种采血方法，实验过程中应充分考虑实验动物

的种类、采血用途、所需血量多少等因素决定采血方法。

·知识目标

了解受检血液样本的种类、差异，明确血液样本

品质的重要性；

掌握大/小鼠眼眶后静脉丛采血、尾尖采血、隐

静脉采血、心脏采血等方法应用范围与优缺点。

·技能目标

掌握抗凝血、血清、血浆样本的制备与保存方法。

·素质目标

爱护实验动物，在尽可能降低动物伤害的基础上

能根据具体动物种类、实验需求，选择合理、合

适的采血方式，为未来综合性动物实验项目的设

计与实施奠定基础。

1.全血包括血细胞和血浆的所有成分

u采集全血时，收集管中必须含有抗凝剂；

u常用的抗凝剂有：肝素、柠檬酸钠和乙二胺四乙酸

(EDTA)，应根据不同研究需要进行选择。

2.血浆是全血经抗凝处理后，通过离心沉淀获

得的不含细胞成分的液体

u制备方法：将抗凝全血采用3000-5000rpm/min

离心10-20min，上清液即为血浆，可分装于-

80℃环境下短期保存，且注意避免反复冻融。

3.血清是全血未经过抗凝处理，血凝块聚缩

释出的液体

u制备方法：可将未加抗凝剂的新鲜血液置于37℃环

境下1h或4℃环境下过夜，2000-3000rpm/min离

心10-20min，上清液即为血清，可分装于-80℃环

境下短期保存，且注意避免反复冻融。

正常的血清或者血浆样本为黄色清液，若

为偏红色，即有红细胞破裂而产生溶血现

象。

溶血后由于细胞内外物质的转移、光学干

扰、与试剂成分发生化学反应等机制对检

验结果产生不同程度的干扰，导致多个临

床生化免疫项目测定结果假性降低或升高。正常血清轻度溶血中度溶血重度溶血

如何避免溶血现象的发生？

采血时要避免实验动物毛发、油脂沾染血液导致溶血，所用的

容器、注射器必须清洁干燥，不能有水或者有机溶剂。

抽血时速度不要太快，速度太快易发生红细胞破碎。

血液转移时，可先拔掉针头再放血，并注意速度不要太快。

收集分离血清的全血时应尽量使血液直接进入小管底部，避免

管壁或管盖上的血液在离心过程中导致溶血。

大/小鼠鼠尾采血法

（1）适用于少量、多次采血

（2）一般可采集血量为0.05-0.1mL，所采

集血液为动静脉混合血

（3）从动物福利角度出发鼠尾采血应优先

选择用于需血量较少的连续多次采血，如血

常规或血糖的动态监测等

大/小鼠眼眶后静脉丛采血

法

（1）适用于需中等量血液、避免小鼠死亡

的血液指标连续监测

（2）采血法方法简单，便于掌握，采血成

功率高，大/小鼠死亡率低，血流较快，采

血量中等，小鼠约可采血0.2-0.3ml，大鼠

约可采血0.4-0.6ml

大/小鼠腹主动脉采血法

（1）适用实验终末期采血，可采集血量

0.8-1.2mL

（2）动物麻醉后，解剖暴露腹主动脉的方

式采集血液，取血量大、不易溶血，适用于

多项目检测，不损伤器官，不会出现因操作

不当造成气栓与瘀血等，有利于病理组织学

检查

心脏采血（非必需勿用）

u应用：适用于需血量大的实验终末期的动物采血；

血常规、免疫、各种生化指标。

u优点：无菌采血，抽血快，血液不易凝集，采血量

大，小鼠采血量0.5-0.8ml，大鼠采血量1-1.5ml。

u缺点：操作难度较大，进针角度和深度不好把握，

新手失败率高；心脏小，心率快，采血比较困难,

可引起心包出血以及心包填塞致小鼠死亡；开胸直

视采血容易剪破心脏大血管；需要麻醉。

心脏采血（非必需勿用）

u注意：此法要求实验者掌握以下要点：要迅速而直

接插入心脏，否则心脏将从针尖处滑脱；如第一次

没刺准将针头抽出重刺不要在心脏周围乱探以免损

伤心肺；要缓慢而稳定的抽吸否则太多的真空反而

使心脏塌陷。

大/小鼠眼眶后静脉丛采血法：使用工具，刺入并切割大/小

鼠眼眶后静脉丛进而收集血液的方法

眼眶后静脉丛采血是一种较为常用的采血方式