重组DNA技术的基本工具课件高二下学期生物人教版选择性必修34.pptx

第3章基因工程;是按照人们的愿望，通过转基因等技术，赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品，从技术操作层面看，由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做重组DNA技术。;;;课堂练习

基于基因工程的诞生和发展的相关基础理论，判断下列说法的正误。

1.1953年，沃森和克里克建立了DNA双螺旋结构模型，并用实验证明了DNA的半保留复制。（）

2.1970年，在细菌体内发现了第一个限制酶，后来又发现了多种限制酶、DNA连接酶等。（）

3.1972年，伯格首先在体外进行了DNA的改造，并构建了第一个体外重组DNA分子。（）

4.1983年，科学家采用花粉管通道法培育了世界上第一例转基因烟草。（）

5.1984年，我国科学家朱作言领导的团队培育了世界上第一条转基因鱼。（）

;3.1重组DNA技术的基本工具;重组DNA技术所需的三种基本工具”;一、限制性内切核酸酶（限制酶）——“分子手术刀”:P71

1.来源：

2.作用：;资料卡限制酶名字的由来：P72

限制酶是如何命名的呢？是用生物属名的头一个字母与种加词的头两个字母，组成了3个字母的略语，以此来表示这个酶是从哪种生物中分离出来的.例如，一种限制酶是从大肠杆菌(Escherichiacoli）的R型菌株分离来的，就用字母EcoR表示;如果它是从大肠杆菌R型菌株中分离出来的第一种限制酶,则进一步表示成EcoRI。;二、拓展应用

1.想一想，为什么限制酶不切割细菌本身的DNA分子？;种类;思考：P72

DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗？为什么？;根据所学知识，据图完成以下填空：

①限制酶②解旋酶③DNA连接酶④DNA聚合酶;练习与应用：P74;三、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”：P72

1.常用载体：质粒;小结：质粒适于做载体的特点（学生朗读）

（1）.有一个至多个限制酶切割位点，供外源DNA片段插入；

（2）.携带外源DNA片段的质粒进入受体细胞后，能在细胞中进行自我复制，或整合到受体DNA上，随受体DNA同步复制；

（3）.人工改造的质粒常带有特殊的标记基因，如四环素抗性基因、氨苄青霉素抗性基因等，便于重组DNA分子的???选。;练习与应用：P74;课堂小结：3.1重组DNA技术的基本工具

一、限制性内切核酸酶（限制酶）——“分子手术刀”

1.来源：原核生物(主要)

2.作用：能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。（体现酶具有专一性的特点）

3.结果：黏性末端和平末端

二、DNA连接酶——“分子缝合针”

E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶

三、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”

1.常用载体：质粒（本质、特点）

2.其他载体：噬菌体、动植物病毒等;高考真题;探究.实践DNA的粗提取与鉴定;二、目的要求:P74

1.了解DNA的物理和化学性质，理解DNA粗提取和鉴定的原理。

2.学会DNA粗提取的方法以及用二苯胺试剂对DNA进行鉴定。;三、方法步骤:P74-75（学生朗读）

1.研磨洋葱：称取约30g洋葱切碎，放入研钵中，

切碎，倒入10mL研磨液，充分研磨。

2.过滤获取含DNA的上清液：在漏斗中垫上纱布，将洋葱研磨液过滤到烧杯中，在4℃冰箱中放置几分钟后，再取上清液。也可直接将研磨液倒入塑料离心管中，在1500r/min的转速下离心5min，再取上清液放入烧杯中。

3.冷却酒精析出DNA：在上清液中加入体积相等的、预冷的酒精溶液(体积分数为95%)，静置2~3min，溶液中出现的白色丝状物就是粗提取的DNA。用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸去上面的水分；或者将溶液倒入塑料离心管中，在10000r/min的转速下离心5min，弃上清液，将管底的沉淀物(粗提取的DNA)晾干。

;三、方法步骤:P74-75

4.DNA的鉴定：取两支20mL的试管，各加入2mol/L的NaCl溶液5mL。将丝状物或沉淀物溶于其中一支试管的NaCI溶液中。然后，向两支试管中各加入4mL的二苯胺试剂。混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min。待试管冷却后，比较两支试管中溶液颜色的变化。

;四、结果分析与评价：P75

1.你提取出白色丝状物或沉淀物了吗？用二苯胺试剂鉴定的结果如何？

2.你能分析出粗提取的DNA中可含有哪些杂质吗？;四、结果分析与评价：P75

3.与其他同学提取的DNA进行比较，看看实验结果有何不同，分析产生差异的原因。;探究.实践DNA的粗提取与鉴定