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第二章细胞工程2.1植物细胞工程
细胞工程是指应用__________________________________和的原理和方法,通过________、__________上的操作,有目的的获得特定的_____的一门综合性生物工程。什么叫细胞工程?按操作对象分植物细胞工程动物细胞工程原理方法研究目的细胞生物学分子生物学细胞或组织水平细胞器水平细胞、组织、器官、个体或其产品发育生物学研究水平
1958196019641971197419021974年,土壤农杆菌的Ti质粒被发现。之后,该质粒应用于植物分子生物学领域,促进了植物细胞工程与分子生物学技术的紧密结合。1971年,卡尔森(P.S.Carlson,1944—2017)诱导烟草种间原生质体融合,获得了第一株体细胞种间杂种植株。1964年,古哈(S.Guha,1938—2007)等在培养毛曼陀罗的花药时,首次得到了由花药中的花粉粒发育而来的胚。1960年,科金(E.C.Cocking,1931—)用真菌的纤维素酶分解番茄根的细胞壁,成功获得了原生质体。1958年,斯图尔德(F.C.Steward,1904—1993)等发现胡萝卜的体细胞可以分化为胚,为细胞全能性理论提供了强有力的支持。1902年,哈伯兰特(G.Haberlandt,1854—1945)提出了细胞全能性的理论,但相关的实验尝试没有成功。科技探索之路——植物细胞工程的发展历程
植物组织培养技术从古至今,我国人民都把兰花看作高洁、典雅的象征,很多人喜欢养兰花。但是兰花种子通常发育不全,在自然条件下萌发率极低;传统分株繁殖的方式,又存在繁殖周期长、繁殖率低等问题,如果靠自然繁殖,兰花的价格可想而知了。如何能让名贵的兰花大量、快速地繁殖,从而走入寻常百姓家呢?【从社会中来】“其芽葺葺(qi),其叶青青,犹绿衣郎,挺节独立,可敬可慕。迨(dài)夫花开,凝晴瀼露,万态千妍,薰风自来,四坐芬郁,岂非入兰室乎!岂非有国香乎!”
一、植物细胞工程的基本技术1.全能性定义:细胞经过分裂和分化后,仍然具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能。2.具有全能性的原因:生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质。3.体现全能性的标志:细胞→完整个体或其他各种细胞实例:胡萝卜韧皮部细胞发育成完整植株受精卵发育成个体(动植物)蜜蜂受精卵发育成工蜂,卵细胞发育成雄峰用一片叶子、一片花瓣、一粒花粉繁殖出新的植株4.不体现全能性的实例:芽原基只能发育为芽,叶原基只能发育为叶5.不体现全能性的原因:基因在特定时间、空间条件下选择性表达1.细胞的全能性:P34
6.全能性大小的比较:①受精卵胚胎干细胞生殖细胞体细胞;②植物细胞动物细胞。随着细胞分化程度的不断提高,细胞的全能性逐渐降低。
(一)植物组织培养技术外植体脱分化愈伤组织再分化根、芽等试管苗驯化移栽完整植株1.概念:3.一般过程:指离体的植物器官、组织或细胞等,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其分化为完整植株的技术。移栽成活2.理论基础:植物细胞的全能性植物细胞工程的基本技术外植体生殖方式:无性生殖分裂方式:有丝分裂
2.植物组织培养的一般过程①相关概念教材P35脱分化:在___________________条件的诱导下,已经分化的细胞__________________,转变为_____________,进而形成_________的过程。一定的激素和营养等失去其特有的结构和功能未分化的细胞愈伤组织愈伤组织:不定形的薄壁组织团块。再分化:愈伤组织重新分化成芽、根等器官的过程。适宜的培养条件:(1)离体状态(2)无菌操作(3)种类齐全、比例适合的营养物质(4)植物激素(主要是生长素和细胞分裂素)诱导和调节(5)适宜的外界条件(温度、pH、光照等)外植体脱分化愈伤组织再分化根、芽等试管苗驯化移栽完整植株
5.探究-实践菊花的组织培养原理:步骤:1)制备外植体2)接种到诱导愈伤组织培养基3)接种到诱导生芽培养基4)接种到诱导生根培养基①植物细胞一般具有___________;②植物激素中______和__________是启动_________、______和______关键激素,它们的_____、_____等都会影响植物细胞的发育方向;生长素细胞分裂素细胞分裂脱分化再分化浓度比例全能性
菊花的组织培养(1)制备外植体消毒:切割:(无菌操作)酒精30S无菌水2-3次次氯酸钠溶液30min材料:幼嫩的菊花茎段2-3次无菌水
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