生化天然产物化学研究方法.ppt

分离过程中，活性测试系在接种了p-388白血病瘤细胞的CDFl系小鼠身上进行。每个小鼠接种的瘤细胞数为1?106。抑瘤活性以给药组动物平均存活天数（T）相对于对照组动物平均存活天数（C）的百分率，即延命效果（T/C）表示。T/C125％时始认为有活性。各个分离部分或馏分的活性筛选均按等剂量原则进行。甲醇、苯、乙酸乙酯及水提取物均按200mg/kg小鼠剂量进行投药，但从苯提取物出发分离得到的各个组分，以苯提取物数量为100时各个馏分的收率为Y，按200?(Y/100)mg/kg小鼠剂量投药。故实际上各个组分（子体）的投药剂量与苯提取物（母体）投药量相当，测得的活性强弱有定量比较意义。投药方法均为腹腔注射，每日1次，从植入肿瘤细胞后次日起连续进行5天。说明：第30页，共47页，星期日，2025年，2月5日（六）天然药物中生物活性成分研究需要注意的几个问题:创新药物的开发是一个高技术、高风险、高投入、高回报、知识密集型的系统工程,涉及化学、药理、制剂、临床医学、毒理等多学科领域。（1个创新药物需10～12年，耗资2～3亿美元；但年销售额可达百亿美元）创新药物与活性化合物是两码事（体内药效、毒性、临床疗效、制剂、吸收、分布、代谢、排泄、原料、成本、市场）。要注重知识产权的保护（活性部位或活性单体）。第31页，共47页，星期日，2025年，2月5日选择适当的活性测试方法天然活性化合物的追踪分离能否取得成功，关键在于有无好的生物活性测试体系。试验模型可以有整体动物、器官、组织、细胞、酶或受体以及体内生物活性物质等。近来并已开始注意在基因调控水平上建立起新的筛选体系。第32页，共47页，星期日，2025年，2月5日（1）动物模型优点：采用整体动物进行的试验与人比较相近。缺点：实验费时费钱，现象复杂，而且动物个体差异以及病理模型难于建立。用动物模型作为指导分离过程的活性筛选方法不太适宜。第33页，共47页，星期日，2025年，2月5日（2）体外模型优点：灵敏、简便、可用于微量样品的测试。利用对酶、受体或体内生物活性物质的抑制或促进作用，以及利用基因调控影响进行的活性测试方法简便易行、可定量。缺点：有时体外活性测试方法所得结果与药物实际在体内的作用并不平行。体外活性测试方法在实际工作中得到越来越广泛的应用。第34页，共47页，星期日，2025年，2月5日第1页，共47页，星期日，2025年，2月5日第二讲天然药物研究与开发一、天然药物的研究开发程序二、天然药物中生物活性成分的研究方法三、我国中药、天然药物化学研究存在的主要问题。第2页，共47页，星期日，2025年，2月5日一、天然药物的研究开发程序（一）从天然药物或中药中开发新药的五种形式：经过文献资料或民间用药的调研或通过现代药理学的筛选研究，发现某种动物、植物、矿物或微生物具有药用价值，然后将其开发成新药。已知某种成分或某类成分具有药用价值或已成为新药，根据动植物的亲缘关系，寻找含有这种或这类成分的动植物，进而将其开发成新药。第3页，共47页，星期日，2025年，2月5日3.在不明确有效成分的基础上，将临床疗效明确的经典方、经验方或经药效学研究具有开发价值的复方中药开发成新药，或将现有新药改变剂型。4.在基本上搞清了有效成分和有效部位的基础上，将有效部位开发成新药。第4页，共47页，星期日，2025年，2月5日5.通过天然药物或中药中的有效成分或生物活性成分的研究，从中发现有药用价值的活性单体或潜在药用价值的活性单体即先导化合物。什么叫先导化合物呢?有一定的生物活性，但因其活性不够显著或毒副作用较大，无法将其开发成新药的具有潜在药用价值的化合物。第5页，共47页，星期日，2025年，2月5日（二）天然物药品（一类新药）的开发研究过程：临床前→临床→试生产活性跟踪指导下的活性成分(结构新颖和作用机制新颖)的提取分离与结构鉴定将是天然产物化学研究的主要形式。选定研究对象→收集资料→筛选活性→有活性者跟踪分离得单体或活性部位→确认结构→动物试验（药效、毒性、药代）→申报临床研究→临床研究（1、2期）→申请新药证书及生产批文号→试生产（3期）→正式生产。（原料供应保障研究、制剂工业化研究。需10~15年时间、1.5~2.5亿美元）第6页，共47页，星期日，2025年，2月5日二、天然药物中生物活性成分的研究方法（一）天然药物及中药中原生生物活性成分的研究:通过调研或广泛筛选需要开发的天然药物。根据原料药中化学成分的性质将其粗分成几个部分，通过活性测试确定有效部位。在活性测试指导下，采用各