DB37T 3493-2019 饲料原料玉米代谢能体外评定法　.docxVIP

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DB37

山东省地方标准DB37/T3493—2019

饲料原料玉米代谢能体外评定法

Determinationofmaizesmetabolicenergyinvitromethod

2019-01-29发布2019-03-01实施

山东省市场监督管理局发布

I

DB37/T3493—2019

前言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本标准由山东省畜牧兽医局提出并监督实施。

本标准由山东省畜牧业标准化技术委员会归口。本标准主要起草单位：山东农业大学。

本标准主要起草人：林海、焦洪超、王晓鹃、赵景鹏、杨景晁。

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DB37/T3493—2019

饲料原料玉米代谢能体外评定法

1范围

本标准规定了通过体外消化酶法和理化评定法进行饲料玉米代谢能评定的方法。本标准适用于饲料玉米代谢能测定。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T5498粮油检验容重测定

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T14699.1饲料采样GB/T17890饲料用玉米

GB/T20806饲料中中性洗涤纤维（NDF）的测定SB/T10146HGT-1000型谷物容重器

3体外消化酶法

3.1原理

通过胃蛋白酶-胰蛋白酶体外消化玉米，根据玉米体外干物质消失率与其代谢能的回归分析，建立玉米体外干物质消失率与代谢能的数学模型，将测得的玉米体外干物质消失率代入构建的数学模型，计算获得玉米的代谢能。

3.2试剂或材料

本标准所用试剂，未注明要求时，均使用分析纯试剂。3.2.1水符合GB/T6682三级水的规定。

3.2.2胃蛋白酶：≥250u/mg。

3.2.3胰蛋白酶：≥600u/mg。

3.2.40.01mol/L盐酸溶液：pH2.0，0.31mL盐酸，注入1000mL水中。

3.2.50.1mol/L磷酸缓冲溶液：pH7.6，31.26gNa2HPO4?12H2O和2.03gNaH2PO4?2H2O分别溶解、混合，溶解于1000mL水中。

3.2.61.0mol/L氢氧化钠溶液：4gNaOH，溶解于100mL水中。

3.2.71.0mg/mL胃蛋白酶溶液：0.1g胃蛋白酶（3.2.2），溶解于100mL0.01mol/L盐酸溶液（3.2.4）

中。

3.2.82.5mg/mL胰蛋白酶溶液：0.25g胰蛋白酶（3.2.3），溶解于100mL0.1mol/L磷酸缓冲溶液（3.2.5）中，使用前半小时配制。

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DB37/T3493—2019

3.2.9透析袋：截留分子量12000D～14000D，使用前以水煮沸10min，清洗干净，于4℃水中浸泡存放，90天内可用。

3.3仪器设备

3.3.1高速粉碎机：转速≥24000rpm。

3.3.2鼓风干燥箱：RT+10℃~200℃,精度±0.5℃。

3.3.3分析天平：0.0001g。

3.3.4水浴恒温振荡器：RT+5℃~100℃,精度±0.5℃。

3.4采样

按GB/T14699.1的规定进行采样。

3.5测定步骤

3.5.1玉米样品使用高速粉碎机（3.3.1）进行粉碎，至全部过0.25mm筛。

3.5.2粉碎后玉米样品于鼓风干燥箱（3.3.2）中，105℃±2℃烘至恒重。

3.5.3准确称取烘干后玉米样品1.0g，置于50mL三角瓶中，准确加入1.0mg/mL胃蛋白酶溶液（3.2.7）10mL，加盖密封，置于水浴恒温振荡器（3.3.4）中，37℃、振幅180r/min连续消化4小时。

3.5.4在消化液中加入1.0mol/LNaOH溶液（3.2.6）0.1ml～0.5ml中和，然后加入2.5mg/mL胰蛋白酶溶液（3.2.8）10mL，混合均匀后转移到透析袋（3.2.9）中，封口，放入盛有300mL磷酸缓冲液（3.2.5）的烧杯中，置于水浴恒温振荡器（3.3.4）中，37℃、振幅180r/min连续消化20小时。