3.1.1重组DNA技术的基本工具 课件（共29张PPT）-高中生物人教版（2025）选择性必修三（29张ppt）（含音频+视频）.pptxVIP

3.1重组DNA技术的基本工具;我国是棉花的生产和消费大国。棉花在种植过程中，常常会受到一些害虫的侵袭，其中以棉铃虫最为常见。棉铃虫可以使棉花产量减少三分之一，严重时，甚至能使一片棉田绝收。大量施用农药杀虫不仅会提高生产成本，还可能造成农产品和环境的污染。要是能培育出自身就能抵抗虫害的棉花新品种，这一问题就会迎刃而解，我国拥有自主知识产权的转基因抗虫棉就是在这样的背景下产生的。为什么传统的杂交育种方法培育不出抗虫棉，基因工程却可以呢？基因工程是如何进行操作的？它给我们的生产和生活带来了怎样的影响？;基因工程：是指按照人们的愿望，通过转基因等技术，赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。从技术操作层面看，由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫作重组DNA技术。

基因工程是在生物化学、分子生物学和微生物学等学科的基础上发展起来的，正是这些学科的基础理论和相关技术的发展催生了基因工程。;基因工程的发展;;2013年，华人科学家张锋（1982一）及其团队首次报道利用最新的基因组编辑技术——CRISPR（成簇规律间隔短回文重复）技术编辑了哺乳动物基因组。该技术可以实现对特定基因的定点插入、敲除或替换。

21世纪以来，科学家发明了多种高通量测序

技术，可以实现低成本测定大量核酸序列，

加速了人们对基因组序列的了解。;从社会中来

番木瓜容易受番木瓜环斑病毒的侵袭。当番木瓜被这种病毒感染后，产量会大大下降。科学家通过精心设计，用“分子工具”培育出了转基因番木瓜，它可以抵御番木瓜环斑病毒。

DNA双螺旋的直径只有2nm，对如此微小的分子进行操作是一项非常精细的工作,更需要专门的“分子工具”。那么，科学家究竞用到了哪些“分子工具”?这些“分子工具”各具有什么特征呢?;在培育转基因番木瓜时，首先要在体外对含有所需要基因的DNA分子进行“切割”、改造和“拼接”。;然后，将重组DNA分子导入番木瓜体细胞内，并使其在细胞中表达。;限制酶：切割DNA分子的工具是限制性内切核酸酶，又称限制酶。

主要来源：从原核生物中分离纯化。

思考：根据你所掌握的知识你能推测限制酶存在于原核生物中的作用是什么吗？

限制酶在原核生物中主要起到切割外源DNA使之失效，从而达到保护自身的目的。;限制性内切核酸酶——“分子手术刀”;特点：特异性

（1）识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列

（2）在特定的位点切割DNA分子。

例如：大肠杆菌的EcoRⅠ限制酶只能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。

;切割部位：使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。

识别序列：大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成。例如，EcoRⅠ、SmaⅠ限制酶的识别序列均为6个核苷酸，也有少数限制酶的识别序列由4个、8个或其他数量的核苷酸组成。;结果：产生黏性末端或平末端;……GAATTC……

……CTTAAG……;作用：将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被________切开的两个__________之间的____________。

;种类：E.coliDNA连接酶与T4DNA连接酶;DNA连接酶——“分子缝合针”;基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”;（3）具有标记基因：具有特殊的标记基因，供重组DNA的_______________。

（4）无毒害作用：对___________无毒害作用，否则__________将受到损伤甚至死亡。

说明：一般来说，天然载体不能同时满足所有条件，要对其进行人工改造才可以使用。;质粒

（1）本质：是一种裸露的、结构简单，独立于真核细胞的细胞核或原核细胞拟核DNA之外，并具有_____________能力的环状双链DNA分子。

（2）质粒适于作基因运载体的特点：

质粒分子上有一个至多个______________位点，供外源DNA片段插入其中。

携带外源DNA片段的质粒进入受体细胞后，能在细胞中进行自我复制，或_______________________，随受体细胞DNA同步复制。

人工改造的质粒常带有______________，便于重组DNA分子的筛选。;;思考·讨论;剪刀和透明胶条分别代表哪种“分子工具”?

提示：剪刀代表限制酶;透明胶条代表DNA连接酶。

你制作的黏性末端的碱基能不能互补配对?如果不能，可能是什么原因造成的?

提示：根据学生实际操作的情况进行指导。如果制作的黏性末端的碱基不能互补配对，可能是剪切位点或连接位点选得不对，也可能是其他原因。

你插入的DNA片段能称得上一个基因吗?

提示：不能，因为基因的长度一般在100个碱基对以上。;一、概念检测

1.DNA连接酶是重组DNA技术常用的一种工具酶。下列相关叙述正确的是()

A.能连接DNA分子双链碱基对之间的氢键

B.