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植物体内硝态氮含量的测定1教师提前烧水，讲解完内容后打开分光光度计开关2学生进教室先做硝态氮提取，后讲解实验内容。小白菜：绿叶片、叶柄两个小组合作：一个小组测叶片，另一个小组测叶柄。二者必须是同几株上的材料。三、实验材料先做：样品中硝酸盐的提取：0102四、操作步骤：同几株小白菜（一组叶片、另一组叶柄）材料剪碎、混匀精确称取1.0g，3份重复注：2个小组合作，结果共用，一起分析0102沸水浴中提取30min放入具塞试管，加去离子水至10ml(最好2次，本实验提取1次)塞子封口，橡皮筋捆扎在一起12植物体内硝态氮含量可以反映土壤氮素供应情况。包括：硝态氮、亚硝态氮。1、作为施肥指标：蔬菜类作物特别是叶菜和根菜中常含有大量硝酸盐，在烹调和腌制过程中可转化为亚硝酸盐而危害健康。因此，硝酸盐含量又成为蔬菜及其加工品的重要品质指标。2、鉴定蔬菜及其加工品质：一、测定意义：人体摄入的硝态氮81.2％来自蔬菜，当人摄取硝酸盐量较大时，体内的NO3－还原成NO2－进入血液，将血液中的血红素变成高铁蛋白，引起肌体中毒。NO2－还可间接与次级胺结合形成强制癌物质－亚硝胺。01咸菜的淹制初期咸菜内会大量积累硝酸盐，硝酸盐含量升高数倍或数十倍，当咸菜淹制成熟后硝酸盐含量减少（很低），所以，咸菜没有淹制完成之前，不要食用。01青菜放置时间延长一天，体内的硝酸盐含量会不断增加，购买蔬菜后及时食用，不要放置时间过长，减少硝酸盐的积累。01二、测定原理：水杨酸法在浓酸条件下，NO3―与水杨酸反应，生成硝基水杨酸。硝基水杨酸在碱性条件下（pH12）呈黄色，最大吸收峰的波长为410nm，在一定范围内，其颜色的深浅与含量成正比，可直接比色测定。0102三、材料：小白菜所用仪器、试剂已备好在实验台上1．标准曲线的制作（学生不做）C(μg/ml)=110.99D410+6.30(S22P型分光光度计)四、操作步骤程序：2．样品液的制备3．样品液的测定——比色4.结果计算2、样品液的制备过滤到25ml容量瓶，去离子水冲洗残渣，定容材料剪碎、混匀精确称取1.0g，3份重复放入具塞试管，加去离子水10ml沸水浴中提取30min塞子封口，橡皮筋捆扎在一起自来水冷却2个小组合作，结果共用分析同几株材料一组叶片、另一组叶柄容量瓶、漏斗洗刷一遍3、样品液的测定——比色4支试管空白试管样品试管3支加5%水杨酸-硫酸0.5ml(在磁盘中加!移液管立即冲洗)冷却比色(410nm)加9.3ml8%NaOH加0.2ml蒸馏水各加0.2ml样品液试管洗刷一遍,防止不净致重复间误差较大溶液加到试管底部，以免影响结果重复性两组合作测定须用同一台分光光度计使用强酸、强碱一定注意安全，如意外发生外溅立即用水冲洗和擦洗室温放置10min*
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