中药分析课件(有效成分).pptVIP

*************************************苷类（二）1薄层色谱法TLC是苷类分析的常用方法，一般用硅胶G作固定相，氯仿-甲醇-水或正丁醇-乙酸-水系统作流动相。显色剂包括10%硫酸乙醇溶液（加热后观察）、三氯化铝（黄酮苷显黄色或蓝色荧光）和茴香醛-硫酸试剂（皂苷显紫红色）等。TLC适用于苷类的初步鉴别和纯度检查，如人参皂苷、甘草苷的鉴别，分离度和灵敏度有限。2高效液相色谱法HPLC是苷类分析的主要方法，通常采用C18反相色谱柱，乙腈-水或甲醇-水系统作流动相，常加入少量酸（如乙酸、甲酸）改善峰形。检测器一般使用DAD（黄酮苷）、ELSD（无紫外吸收的皂苷）或质谱检测器。HPLC技术在中药苷类的定性定量分析中应用广泛，如人参皂苷Rg1、Rb1，甘草中甘草酸，银杏叶中银杏黄酮苷等的含量测定。3毛细管电泳法CE因其高效、微量和高分辨率特点，在苷类分析中应用日益广泛。常用模式包括毛细管区带电泳（CZE）和胶束电动毛细管色谱（MEKC）。缓冲液常选用硼酸盐或磷酸盐，pH值需优化以保证良好分离。CE适用于分析极性强的苷类，如人参皂苷、甘草酸和黄酮苷，尤其适合带电荷的苷类分析。与质谱联用可提供结构信息和提高灵敏度。4代表药材实例人参（人参皂苷）：采用HPLC-ELSD方法，C18柱，乙腈-水梯度洗脱，测定Rg1、Re、Rb1等皂苷。甘草（甘草酸）：采用HPLC-DAD法，C18柱，乙腈-0.1%磷酸水溶液梯度洗脱，250nm检测。黄芩（黄芩苷）：采用HPLC-DAD法，C18柱，甲醇-0.4%磷酸水溶液梯度洗脱，276nm检测。这些方法已被收入中国药典，用于苷类药材的质量控制。黄酮类（一）基本结构特点黄酮类化合物基本骨架为2-苯基色原酮（C6-C3-C6），包括黄酮、黄酮醇、黄烷酮、二氢黄酮、查尔酮、花色素等亚类。在植物中常以苷的形式存在，糖基多连接在C-3、C-7位羟基上。结构特点是A、B两环上常带有多个羟基或甲氧基，C环上C-4位常有羰基，具有共轭双键系统。理化性质黄酮苷元通常难溶于水，易溶于醇、丙酮等有机溶剂；黄酮苷水溶性较好。多数黄酮化合物呈淡黄色至黄色；对酸、碱和热相对稳定。具有特征紫外吸收光谱，一般在250-280nm（苯环吸收带）和330-360nm（黄酮骨架吸收带）有最大吸收。与特定试剂可发生显色反应，如与AlCl?形成黄色或蓝色荧光。提取方法醇提法：常用70-80%甲醇或乙醇提取，是最常用的方法。超声提取：提高提取效率，减少热降解风险，适合热敏性黄酮。微波辅助提取：缩短提取时间，提高得率。液-液萃取：如乙酸乙酯萃取，用于初步分离。大孔树脂纯化：如AB-8、D101等树脂对黄酮具有良好的吸附性能，是黄酮纯化的常用方法，可通过不同比例乙醇逐级洗脱获得不同极性的黄酮组分。黄酮类（二）薄层色谱法TLC是黄酮类化合物分析的传统方法，通常采用硅胶G为固定相，氯仿-甲醇-水或乙酸乙酯-甲酸-水等为流动相。显色剂常用1%三氯化铝乙醇溶液（紫外灯下观察黄色或蓝色荧光），5%三氯化铁乙醇溶液（酚性羟基显蓝色），2,6-二氯对苯醌氯亚胺（苯酚性羟基显蓝色）等。TLC法简便直观，适用于黄酮类化合物的快速鉴别和初步分离。高效液相色谱法HPLC是黄酮类分析的主要方法，通常采用C18反相色谱柱，乙腈-0.1%磷酸水溶液或甲醇-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱，多波长紫外或DAD检测。黄酮类化合物多数在250-280nm和330-370nm有特征吸收，可用于特异性检测。色谱条件优化需考虑pH值对分离的影响，通常在酸性条件下峰形更好。HPLC-DAD-MS联用可同时获得紫外光谱和质谱信息，有助于黄酮类化合物的结构鉴定。代表药材实例黄芩：主要含黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素等黄酮类成分，采用HPLC-DAD法，C18柱，乙腈-0.4%磷酸水溶液梯度洗脱，检测波长276nm。葛根：含大豆苷元、大豆苷等黄酮类，采用HPLC-DAD法，C18柱，甲醇-水梯度洗脱，检测波长250nm。银杏叶：含槲皮素、山柰酚苷等黄酮类，采用HPLC-DAD法，C18柱，甲醇-0.5%磷酸水溶液梯度洗脱，检测波长360nm，黄酮总量通常用分光光度法测定。萜类（一）10碳原子基本单元萜类由异戊二烯单元（C5H8）构成，根据单元数量分类6主要萜类亚类包括单萜、倍半萜、二萜、三萜、四萜和多萜20%中药含萜比例约有五分之一的中药材含有萜类活性成分4500+已知萜类化合物自然界中已鉴定的萜类化合物数量众多萜类是由异戊二烯（C?H?）单元组成的一大类天然产物，广泛存在于中药材中。根据分子中异戊二烯单元的数量，可分为单萜（C?