链霉素诱变育种的方案.pptVIP

与营养缺陷突变有关的三类遗传型个体野生型菌株wildtypestrain原始菌株营养缺陷型auxotroph人工诱变或自然突变原养型菌株prototroph回复突变或重组变异三、营养缺陷型菌株的筛选第30页，共56页，星期日，2025年，2月5日与筛选营养缺陷型有关三类培养基

(1)基本培养基MM(2)完全培养基CM(3)补充培养基SM第31页，共56页，星期日，2025年，2月5日突变株的表型 检出方法营养缺陷型补充培养基（auxotroph） 抗性突变型药物培养基（resistantmutant）条件致死型培养条件改变（conditionallethalmutant）基因突变的类型第32页，共56页，星期日，2025年，2月5日诱发突变淘汰野生型菌株检出缺陷性鉴别缺陷性营养缺陷性菌株的分离和筛选第33页，共56页，星期日，2025年，2月5日选择合适的诱变剂与诱变方法诱变剂和诱变方法都要简便有效主要的诱变剂亚硝基胍,紫外线,亚硝酸诱变方法物理方法化学方法注意突变率还与诱变剂量有关（一）、营养缺陷性的诱变第34页，共56页，星期日，2025年，2月5日1.抗生素法青霉素法（细菌）作用于细菌细胞壁的主要成分肽聚糖制霉菌法（酵母菌）作用于真菌细胞膜上的甾醇（二）、淘汰野生型菌株第35页，共56页，星期日，2025年，2月5日2.菌丝过滤法适用于真菌和放线菌作用于丝状菌的孢子3.高温杀菌法适用于芽孢菌类作用于芽孢菌类的芽孢和营养体第36页，共56页，星期日，2025年，2月5日（三）、检出营养缺陷型①夹层培养法②限量补充培养法③影印接种法④逐个检出法第37页，共56页，星期日，2025年，2月5日1.夹层培养法（延迟补给法）第38页，共56页，星期日，2025年，2月5日2.限量补充培养法第39页，共56页，星期日，2025年，2月5日3.影印接种法第40页，共56页，星期日，2025年，2月5日关于链霉素诱变育种的方案第1页，共56页，星期日，2025年，2月5日元芳!此事你怎么看?第2页，共56页，星期日，2025年，2月5日看目录一、诱发突变（一）、出发菌株选择（二）、诱变剂及诱变剂量的选择（三）、影响诱变效果的因素（四）、平板分离二、突变株的筛选（一）、初筛（二）、复筛（三）、产物活性测定三、营养缺陷型菌株的筛选四、高产变株最佳环境条件的调整第3页，共56页，星期日，2025年，2月5日插曲(很有必要)诱变育种的一般程序如下：出发菌株----菌种纯化(出发菌株性能测定)----制备斜面孢子----制备单孢子悬液(悬液进行活菌计数)----诱变剂处理(存活菌数的测定并计算存活率)----平板分离(测定变异率)----挑取变异菌落并移植至斜面上----初筛(初筛数据分析，生产性状的粗测)----斜面传代----复筛(复筛数据分析，精确测定生产性状)----变异菌株(菌株参数分析)----小型或中型投产试验----大型投产试验。

第4页，共56页，星期日，2025年，2月5日（一）、出发菌株的选择选择从自然界(土壤）中分离链霉菌放线菌是产生抗生素活性最大的一类微生物，迄今已在工业、医学、农业上都有利用抗生素成功的实例，而链霉菌又是放线菌中抗生素的主要产生菌，具有广泛的物种多样性和代谢多样性，是重要的资源微生物，但在链霉菌中普遍存在遗传不稳定性，而引起抗生素产量下降。因此,我们要研究提高抗生素产量的方法，已期获得更大产量的抗生素，而提高产量的最重要途径是通过育种改变生产菌种。诱变育种是一种简便易行而且快速的选育方法，因而在抗生素的菌种筛选中应用最广泛。一、诱发突变第5页，共56页，星期日，2025年，2月5日菌种的纯化：1、土壤用无菌水浸泡，静置取上清2、做梯度——上清分别稀释10倍、100倍、1000倍等等3、使用链霉菌优势培养基（在上边链霉菌比其他菌长的快），用步骤2的各个梯度液体分别铺板。4、按照链霉菌最适生长温度培养。5、选取菌落数在100个左右，菌落清晰无重叠的平板。6、根据伯杰氏菌种鉴定手册中链霉菌的菌落