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中职农林牧渔大类《植物科学基础》(农技版)(全一册)
项目一《任务一显微镜下的植物细胞》课文知识点归纳
一、实验准备
实验材料选择
常见植物材料:洋葱鳞片叶表皮细胞是常用材料,其细胞较大,结构清晰,易于观察。它属于保护组织,细胞排列紧密,适合用于观察植物细胞的基本结构。菠菜叶肉细胞可用于观察叶绿体,其叶肉细胞中叶绿体丰富,便于观察细胞器的形态和分布。番茄果肉细胞常用于观察植物细胞的形态多样性,番茄果肉细胞呈圆球形或椭圆形,分散存在,便于单个细胞的观察。
材料处理要点:对于洋葱鳞片叶,需用刀片在鳞片叶内表皮划取约1cm2大小的正方形,再用镊子轻轻撕取内表皮。撕取时要尽量保证表皮的完整性,避免细胞破损。菠菜叶片应选择新鲜、幼嫩的部分,可将叶片切成小块,利用其下表皮稍带叶肉的部分制作临时装片,这样能保证叶肉细胞的活性和叶绿体的正常形态。番茄果肉则用解剖针挑取少许,均匀涂抹在载玻片上的水滴中,防止细胞堆积影响观察。
实验器具与试剂
显微镜:显微镜是观察植物细胞的核心工具。其主要结构包括目镜、物镜、反光镜、遮光器、粗准焦螺旋和细准焦螺旋等。目镜起放大作用,常见的目镜放大倍数有5×、10×、16×等。物镜的放大倍数更为多样,如4×、10×、40×、100×等,其中100×物镜为油镜,使用时需在玻片标本上滴加香柏油以提高分辨率。反光镜用于调节光线,有平面镜和凹面镜两面,光线强时用平面镜,光线弱时用凹面镜。遮光器上有大小不同的光圈,可调节通光量。粗准焦螺旋用于快速升降镜筒,寻找物像;细准焦螺旋用于微调物像清晰度。
其他器具:载玻片和盖玻片是制作临时装片的必备材料。载玻片用于承载标本,盖玻片则覆盖在标本上,防止标本干燥和物镜污染,同时使光线均匀透过标本。镊子用于夹取材料,刀片用于切割植物组织,滴管用于吸取和滴加试剂,吸水纸用于吸取多余水分或试剂。
试剂:蒸馏水用于制作临时装片时保持细胞的正常形态,防止细胞失水或吸水变形。碘液是常用的染色剂,植物细胞的细胞核等结构易被碘液染成深色,便于观察。在制作洋葱鳞片叶表皮细胞临时装片时,滴加碘液进行染色,能清晰显示细胞核、细胞质等结构。
显微镜操作要点
取镜与安放
取镜方法:右手握住镜臂,左手托住镜座,将显微镜从镜箱中取出。取镜过程要平稳,避免震动,防止显微镜部件松动。
安放位置:将显微镜放在实验台上,略偏左的位置,便于用左眼观察,右眼同时睁开绘图或记录。显微镜距实验台边缘约7cm,防止显微镜滑落。
对光
转动转换器:使低倍物镜对准通光孔。转动时要注意物镜与通光孔的中心对齐,可通过观察物镜前端与载物台的距离来判断,一般物镜前端距载物台约2cm。
调节光圈和反光镜:转动遮光器,选择合适的光圈对准通光孔。光线较暗时,选用大光圈;光线较强时,选用小光圈。然后转动反光镜,使光线通过通光孔反射到镜筒内。通过目镜观察,直到看到明亮、均匀的圆形视野为止。
制作临时装片
1.洋葱鳞片叶表皮细胞临时装片制作步骤
擦片:用洁净的纱布将载玻片和盖玻片擦拭干净,防止玻片上的杂质影响观察效果。
滴水:在载玻片中央滴一滴蒸馏水,水滴大小要适中,以恰好能覆盖盖玻片为宜。蒸馏水可保持细胞的正常形态,维持细胞的生理活性。
取材:按前文所述方法撕取洋葱鳞片叶内表皮,将其放入载玻片的水滴中,用镊子将表皮展平,避免细胞重叠。
盖片:用镊子夹起盖玻片,使盖玻片的一侧先接触水滴,然后缓缓放下,盖在要观察的材料上。这样可避免盖玻片下产生气泡,影响观察。若有气泡产生,可用镊子轻轻按压盖玻片,将气泡赶出。
染色:在盖玻片的一侧滴加碘液,另一侧用吸水纸吸引,使碘液浸润整个标本。染色时间不宜过长或过短,过长会使细胞染色过深,结构不清晰;过短则染色不足,难以观察到细胞核等结构。
1.菠菜叶肉细胞临时装片制作步骤
擦片、滴水步骤与洋葱鳞片叶表皮细胞临时装片制作相同。
取材:选取菠菜叶下表皮稍带叶肉的部分,用刀片切割成小块后放入水滴中。
盖片:操作方法同洋葱鳞片叶表皮细胞临时装片制作。由于菠菜叶肉细胞含有叶绿体,一般不需要染色即可观察到细胞结构。
1.番茄果肉细胞临时装片制作步骤
擦片、滴水步骤一致。
取材:用解剖针挑取少许番茄果肉,均匀涂抹在水滴中。
盖片:按照正确方法盖上盖玻片。番茄果肉细胞本身颜色较浅,如需更清晰观察细胞结构,可进行适当染色。
观察
低倍镜观察:将制作好的临时装片放在载物台上,用压片夹固定好。转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓下降,此时眼睛要从侧面注视物镜,防止物镜压碎玻片标本。当物镜接近玻片标本时(约0.5cm),停止下降。然后左眼注视目镜,反向转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓上升,直到看到物像。再转动细准焦螺旋,使物像更加清晰。在低倍镜下观察到的细胞数量多、体积小,视野范围大。
高倍镜观察:在低倍镜下找到要观察的细胞后,将其移至视野
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