第三章 基因表达的调控教学课件.ppt

一、DNA水平的调控二、转录水平的调控三、转录后水平的调控四、翻译水平的调控五、翻译后水平的调控六、组织特异性表达和时相性真核生物基因表达在DNA水平的调控主要通过一列几种方式：1、染色质的丢失一些低等生物（如线虫等）的细胞发育过程中发现染色质丢失现象及高等动物红细胞在发育成熟过程中也有染色质的丢失，都是一些不可逆的调控。2、基因扩增（geneamplification）细胞在发育分化或环境改变时，对某种基因产物的需要量剧增，而单纯靠调节其表达活性不足以满足需要，只有增加这种基因的拷贝数（即基因的扩增或基因放大）来满足需要。这是调控基因表达活性的一种有效方式。3、基因重排（generearrangement）基因重排是指基因片段改变原来存在顺序，通过调整有关基因片段的衔接顺序，再重排成为一个完整的转录单位。基因重排是DNA水平调控的重要方式之一。一、DNA水平的调控4、DNA甲基化在真核生物基因表达调控中，甲基化起着重要作用。一般认为，DNA甲基化与基因的表达呈反比关系。甲基化程度高，基因的表达则降低。去甲基化，又可使基因的表达增加。基因某一特定位点（尤其是靠近5＇端调控序列）的去甲基化可使基因的转录活性增加。5、染色质结构对基因表达的调控作用组蛋白与DNA结合，可保护DNA免受损伤，维持基因组稳定性，抑制基因的表达。去除组蛋白则基因转录活性增高。这种组蛋白与DNA结合与解离是真核基因表达调控的重要机制之一。转录水平的调控是真核生物基因表达调控中重要的环节。调控作用主要是通过反式作用因子、顺式作用元件和RNA聚合酶的相互作用来完成的。调控作用主要是反式作用因子结合顺式作用元件后影响转录起始复合物的形成。了解真核生物基因表达在转录水平的调控，主要是了解反式作用因子的特点以及反式作用因子对转录起始的调控。二、转录水平的调控无论是原核生物还是真核生物，在转录起始复合物形成过程中，RNA聚合酶（RNApol）与启动子的结合都是关键的一步。真核生物的RNApolⅠ、Ⅱ、Ⅲ，识别不同的启动子，需要不同的转录因子（transcriptionfactor,TF）：TFⅠ、TFⅡ、TFⅢ。每一类又依发现先后命名为A、B……，如TFⅢA、TFⅢB等。真核生物的转录起始复合物的形成过程有三步：①TFⅡD结合TATA盒；②RNApol识别并结合TFⅡD-DNA复合物，形成的是闭合的复合物，DNA双链没有打开，尚不能启动转录；③其它转录因子与RNApol结合，转录起始部位的DNA解链，形成转录起始复合物，或称开放的复合物（opencomplex），开始转录。在转录调控过程中，反式作用因子的作用主要是促进或抑制TFⅡD与TATA盒结合、RNApol与TFⅡD-DNA复合物结合以及转录起始复合物的形成。（一）转录起始复合物的形成1、反式作用因子（trans-actingfactor）真核细胞内含有大量的序列特异性的DNA结合蛋白，其中一些蛋白的主要功能是使基因开放或关闭，称为反式作用因子，简称反式因子，这是一类细胞核内蛋白因子。在结构上含有与DNA结合的结构域，是结合特异的DNA序列所必需的。反式作用因子在细胞中的数量很小，大约每3000个核小体中有一个分子，或每个哺乳类细胞中有104个左右。这些蛋白质识别特定的DNA序列（通常8—15个核苷酸），与DNA结合后，可以促进（正调控）或抑制（负调控）一个邻近基因的转录。在多细胞有机体中，不同的细胞类型具有不同的反式作用因子群体，引起每一细胞类型表达不同的成套基因。（二）反式作用因子①一般具有三个功能结构域：DNA识别结合域，转录活性域，结合其它蛋白的结合域。这些功能区含有几十到几百个氨基酸残基。②能识别并结合上游调控区中的顺式作用元件。③对基因表达有正性和负性调控作用，即激活和阻遏基因的表达。具有正性调节作用的反式因子和相应的顺式元件结合后，可能还要通过与RNA聚合酶或其它反式因子与相应的顺式元件结合后才能产生效应。2、反式作用因子的主要特点3、反式作用因子结构域的模式（1）DNA结合域（DNA-bindingdomain）①锌指结构（zincfingermotif）指在结合DNA的结构域中含有较多的半胱氨酸和组氨酸的区域，借肽链的弯曲使2个Cys和2个His或4个Cys与一个锌离子络合成的指状结构。②同源结构域（homodomain,HD）指在结合DNA的结构域中的一段保守序列，由60个左右氨基酸组成的螺旋-回折-螺旋