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膜片钳技术概述

1概述

2膜片钳记录基本步骤

目录

3常用检测基本原理

4膜片钳技术应用

PART1概述

概述

研究离子通道

1、结构生化确定蛋白质氨基酸序列+X线衍射确定结构+……

2、功能电生理技术(膜片钳+动态钳……)

3、结构和功能电生理技术+转基因技术+……

概述

概述

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概述

•蒸汽机的出现推动了英国的工业革命

•膜片钳技术打开了细胞电生理研究的大门

概述

离子通道是细胞膜上的一种

特殊整合蛋白,对某些离子

(K+/Na+/Ca2+)能选择通

透,其功能是细胞生物电活

动的基础。

特性:

通透性(permeation)

选择性(selectivity)

门控性(gating)

概述

配体门控通道

阳离子通道:乙酰胆碱、谷

氨酸、五羟色胺受体

阴离子通道:甘氨酸/GABA

受体

概述

膜片钳技术的发展历程

•1963年,霍奇金和赫胥黎发现了电压钳技术,并获得了诺贝尔生理或医学奖膜片钳技术打

开了细胞电生理研究的大门

•1976年,德国马克斯普朗克生物物理化学研究所ErwinNeher和BertSakmann首次在青蛙肌

细胞上用双电极钳制膜电位的同时,记录到Ach激活的单通道离子电流,从而产生了膜片钳

技术。

•1981年,德国马克斯普朗克生物物理化学研究所OwenHamill和ErwinNeher等对膜片钳技术

进行了改进,引进了膜片游离技术和全细胞记录技术,从而使该技术更趋完善,具有1pA

的电流灵敏度、1μm的空间分辨率和10μs的时间分辨率。

•1983年10月,《Single-ChannelRecording》一书问世,奠定了膜片钳技术的里程碑。

•1991年,德国马克斯普朗克生物物理化学研究所ErwinNeher和BertSakmann也因其杰出的

工作和突出贡献,荣获诺贝尔医学和生理学奖。

概述

概述

ErwinNeher

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