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临床微生物学探索微观世界,了解疾病本源
课程目标与内容掌握基础理论学习微生物分类与特性实验室诊断技能培养标本采集和检测方法病原体识别了解常见病原体特征临床应用
临床微生物学的历史发展117世纪列文虎克发明显微镜,首次观察微生物219世纪巴斯德建立细菌学,发现微生物致病理论320世纪初弗莱明发现青霉素,开启抗生素时代4现代分子生物学技术革命性改变微生物检测方法
临床微生物学在医学中的重要性精准诊断确定病原体种类和特性治疗指导药敏试验指导抗生素选择疾病预防监测流行病学和耐药性趋势
微生物的分类细菌原核生物,无核膜,含肽聚糖细胞壁病毒非细胞结构,依赖宿主细胞复制真菌真核生物,含几丁质细胞壁寄生虫在宿主体内生存的多细胞生物
细菌的基本结构细胞壁提供形态和保护,分为革兰阳性和阴性细胞膜选择性屏障,调节物质进出核质含DNA,无核膜包裹附属结构鞭毛、菌毛和荚膜等特殊结构
细菌的生理特性代谢类型异养型、自养型、兼性菌等多种代谢方式生长条件温度、pH值、氧气需求等影响生长产酶特性产生多种酶类,参与代谢和致病过程毒素产生外毒素和内毒素是致病重要因素
细菌的遗传与变异基因突变自发或诱导DNA改变质粒传递通过接合作用传递遗传物质转导作用噬菌体介导的DNA传递转化作用吸收环境中的外源DNA
细菌的生长与繁殖时间(小时)菌落数(对数值)细菌生长曲线包括:延滞期、对数期、稳定期、衰退期二分裂是主要繁殖方式,世代时间短,复制迅速
病毒的基本结构蛋白质外壳由衣壳蛋白组成,保护病毒核酸核酸基因组DNA或RNA,单链或双链形式包膜部分病毒具有,源自宿主细胞膜表面蛋白介导病毒与宿主细胞的结合
病毒的复制周期吸附病毒表面蛋白与宿主受体结合穿透病毒核酸进入宿主细胞生物合成利用宿主机制合成病毒成分组装病毒核酸和蛋白质组装成病毒颗粒释放新病毒颗粒离开宿主细胞
真菌的基本特征结构特点真核生物细胞壁含几丁质菌丝或酵母形态生长方式多样分类丝状真菌酵母菌二相型真菌皮肤癣菌繁殖无性繁殖为主产生各类孢子部分有有性生殖生长速度较细菌慢
寄生虫的基本特征寄生虫分类:原虫、蠕虫和节肢动物生活史复杂,常需中间宿主多种传播途径:食物、水、昆虫等
微生物与宿主的相互作用1共生关系微生物和宿主互利2定植微生物在宿主表面生长而不致病感染微生物入侵并损害宿主
免疫系统概述细胞成分白细胞、巨噬细胞和淋巴细胞等体液成分抗体、补体和细胞因子等免疫器官骨髓、胸腺、脾脏和淋巴结等
先天性免疫反应0小时即刻反应微生物入侵后立即激活4种物理屏障皮肤、黏膜、纤毛、胃酸5类免疫细胞中性粒细胞、单核细胞、NK细胞等多种可溶性因子补体、干扰素、溶菌酶等
获得性免疫反应特点体液免疫细胞免疫主要细胞B淋巴细胞T淋巴细胞效应分子抗体(免疫球蛋白)细胞因子主要靶标细胞外病原体细胞内病原体激活时间数天至数周数天至数周记忆特性有记忆细胞有记忆细胞
微生物的致病机制黏附和定植通过特异性结构附着于宿主细胞入侵突破宿主防御屏障毒素产生释放内毒素或外毒素损害组织免疫逃避通过多种机制躲避宿主免疫攻击
细菌感染的病理生理学炎症反应红、肿、热、痛,局部白细胞浸润脓肿形成化脓性细菌引起组织坏死和脓液积聚全身症状发热、白细胞增多、器官功能障碍组织修复纤维化、瘢痕形成、功能损伤
病毒感染的病理生理学细胞病变病毒复制导致细胞死亡1细胞融合形成多核巨细胞2包涵体特征性细胞内结构3免疫反应免疫介导的组织损伤4
真菌感染的病理生理学组织侵袭菌丝直接穿透组织过敏反应对真菌抗原产生超敏反应肉芽肿形成慢性真菌感染特征性病变
寄生虫感染的病理生理学机械损伤蠕虫运动、吸附和穿透引起组织损伤肠道蛔虫可引起肠梗阻营养竞争吸收宿主营养物质,导致宿主营养缺乏钩虫吸血可引起贫血免疫反应宿主对寄生虫的持续免疫反应产生嗜酸性粒细胞浸润和纤维化
临床微生物实验室安全操作规程个人防护实验服、手套、口罩生物安全柜操作避免饮食、吸烟标本处理密闭容器运输潜在危险标记避免气溶胶产生废弃物处理高压灭菌化学消毒专用容器收集意外处理溢洒处理程序暴露后预防事故报告制度
无菌操作技术手部准备彻底洗手消毒,戴无菌手套接种环灭菌酒精灯火焰灼烧至红热,冷却后使用试管操作开口斜放,避免外部污染4培养皿接种迅速操作,减少暴露时间
临床标本的采集血液尿液痰液伤口拭子粪便其他标本采集原则:正确时机,无菌条件,足够量,代表性部位采集前避免抗生素使用,确保标本质量
标本的运送与保存温度控制常温、4°C或-70°C根据需要保存时间限制大多数标本2小时内送检容器选择无菌、密闭、专用容器运送培养基特殊标本需专用保存液
显微镜检查技术涂片制备薄而均匀的涂片自然干燥或热固定避免污染和气泡染色方法革兰染色抗酸染色荧光染色墨汁负染镜检技巧低倍找视野高倍观察细节油镜细看形态系统扫描整个视野
培养基的种类与应用基础培养基:营养琼脂,支持大多数非
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