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试验二总RNA的提取和检测
试验目的
把握从动物组织细胞中提取总RNA的方法;
生疏紫外吸取法检测RNA浓度与纯度的原理及测定方法;
把握RNA琼脂糖凝胶电泳方法并分析总RNA的电泳图谱;
试验原理
〔一〕概述
1.10-5μgRNA/细胞含有rRNA80-85%:28S18S5S
tRNA,snRNA10-15%
mRNA1-5%
mRNA3’端存在20-250个多聚腺苷酸(polyA)构造,可用oligo(dT)亲和层析柱分别mRNA。
RNA分别的方法:异硫氰酸胍氯化铯超速离心法,盐酸胍-有机溶剂法,氯化锂-尿素法,蛋白酶K-细
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