金黄色葡萄球菌生物转运蛋白BioY的鉴定及功能研究.docxVIP

下载本文档

1
0
约1.13万字
约 6页
2025-04-19 发布于北京
举报
版权申诉

金黄色葡萄球菌生物转运蛋白BioY的鉴定及功能研究.docx

1、本文档共6页，可阅读全部内容。
2、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击这里二次下载。
4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
5、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
6、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
7、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
8、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次，网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档

金黄色葡萄球菌生物转运蛋白BioY的鉴定及功能研究

摘要：能量耦合因子转运蛋白是一类新发现的，主要负责微量营养物质转运的蛋白质复合体，隶属于ABC转运蛋白超家族。金黄色葡萄球菌生物素转运蛋白BioY作为能量耦合因子转运蛋白中的底物结合蛋白，能够特异性识别底物生物素。我们通过滤纸片抑菌圈试验，发现表达金黄色葡萄球菌BioY的大肠杆菌细胞对红霉素，链霉素及链霉素的敏感性都显著增加。我们推定是BioY在宿主细胞表面形成了功能性通道以帮助小分子抗菌试剂进入细胞。我们对表达BioY突变体的细胞也进行了试验，发现表达D157K/K160E的大肠杆菌细胞对抗菌试剂的敏感性与未诱导细胞一致，我们认为产生该现象的原因与D157及K160氨基酸位点起关键性“门控”作用有关，这为我们进一步研究BioY的转运机制奠定基础。

关键词：能量耦合因子转运蛋白，金黄色葡萄球菌，BioY，滤纸片抑菌圈试验，门控

TheIdentificationandFunctionalStudyoftheBiotinTransporterBioYfromStaphylococcusaureus

WeiweiTang,KunTian,ZiqingZhu,MeilingLiu*

ChangshaMedicalUniversity,SchoolofBasicMedicalSciences,410219

Abstract:Energy-couplingfactortransportersareanewlydefinedclassofABCtransporters,mainlyresponsiblefortheuptakeofmicronutrients.TheStaphylococcusaureusbiotintransporterBioYasthesubstratebindingproteincanspecificallyrecognizethesubstratebiotin.Byapplyingafilterdiskdiffusionassay,wesurprisinglydiscoveredthatthesusceptibilityofEscherichiacolitoantimicrobialagenterythromycin,streptomycin,andchloramphenicolweresignificantlyincreasedwhenStaphylococcusaureusBioYwasheterologouslyoverexpressedinthecells.WereasonedrecombinantSaBioYadoptedafunctionalchannelinthemembraneofE.coliforlowmolecularweightantimicrobialagentstodiffusethrough.AlibraryofSaBioYmutantswerealsoscreenedinthisassayandtheoverexpressionofD157K/K160Eshowcasedthesamephenotypewithun-inducedone.WeproposedthatD157andK160playedas“gating”aminoacidresiduesduringthetransportation,whichpavesthewayforfurtherstudyofthetransportmechanismofBioY.

Keywords:energy-couplingfactortransporter,Staphylococcusaureus,BioY,filterdiskdiffusionassay,gating

???????能量耦合因子（Energy-couplingfactor,ECF）转运蛋白是一类新发现的，隶属于ABC（ATP-bindingcassette）转运蛋白超家族的蛋白质成员[1]。它们广泛存在于原核细菌及古生菌中，主要进行微量营养物质，尤其是水溶性的维生素以及过渡态的金属离子如Ni2+和Co2+的跨膜转运[2]。ECF转运蛋白由两个相同的或高度同源的ATP酶，EcfA和EcfA’，以及两个完整跨膜蛋白EcfT和S蛋白构成。由EcfA，Ecf