超高效液相色谱-串联质谱法研究木瓜中熊果酸和齐墩果酸含量 .pdfVIP

超^^目色谱■串瞄晋却开戏瓜中口齐量

酸木瓜［Pseudocydoniasinensis(Thouin)C.K.Schneid.］别名邹皮木瓜、木瓜海棠、木瓜等，是蔷薇科木瓜属灌木

或小乔木［1］。酸木瓜中含较多果酸和单宁，起来酸、涩，解腻开胃，舒筋湿痹，在云南人的生活和菜品中多为常见。

《诗经》记载：“投我以木瓜，报之以琼堀。”古人将酸木瓜视为和“琼堀”一般美好的事物。古籍中对酸木瓜的记载还有很

多，关于木瓜泡酒早有记载。《齐民要术》记载，木瓜以苦酒鼓汁，密度之，可按酒食，密封藏百日，乃食之，甚益人。

酸木瓜中的主要化学成分有熊果酸、齐墩果酸、苹果酸、绿原酸、芦丁、多糖、黄酮、糅质等［2］。其中，熊果酸和齐墩

果酸为五环三菇有机酸。据文献报道，齐墩果酸可消炎抑菌，降低转氨酶，促进肝细胞再生，防止肝硬化，强心、利尿、

降血脂、降血糖，增强机体免疫力［3］。熊果酸是齐墩果酸的同分异构体，药理研究证明，熊果酸具有抗癌、促进免疫、

稳定心血管、增强毛细血管弹性等作用。由于木瓜具有药用、食用、观赏等多种用途，越来越受人们的喜爱。基于此，

本文采用有机溶剂超声提取，离心，旋转浓缩，C18柱净化，正己烷洗脱，氮吹，旨在探索酸木瓜中熊果酸和齐墩果酸

的提取工艺。实验结果表明，这种方法快速，且样品损失较小，克服了传统方法的不足，具有高效、简便、快速、重复

性好的优点，可以为木瓜的开发利用提供参考依据。

1材料与方法

1.1仪器、试剂、材料

①仪器。岛津液相色谱仪LC-30A,与三重四极杆质谱仪LCS-8050联用系统；GH252双量程电子天平；超声

提取仪；艾本德离心机；旋转蒸发仪；氮吹仪。②试剂。甲醇、正己烷、乙醇，均为色谱纯；C18固相萃取柱。③材料。

熊果酸、齐墩果酸标准品(中国食品药品检定院)。

1.2分析条件

液相色谱条件：XRODS-m(2.0mml.Dx75mm,1.6pm)；流动相：A一甲醇，B一纯水；流速：0.4mL-min-1；

柱温：40°C；进样体积：5jjL；质谱条件：扫离子模式，多反应监测(R),负离子扫描模式。

用1pgmL-1熊果酸和齐墩果酸标准品进行一级质谱和二级质谱扫描，并做电压优化，确定熊果酸和齐墩果酸的

母离子为455.3,子离子为455.45,锥孔电压熊果酸为25V,齐墩果酸为28V,碰撞电压均为24V。

1.3样品前处理

1.3.1熊果酸和齐墩果酸2种不同前处理方法比较

(1)方法1。取5批次怒江州泸水市老窝乡不同产地的酸木瓜鲜果，去核、粉碎，精密称定5.0g,于50mL具

塞离心管中，加入50mL乙醇，70°C超声提取30min,8000r离心，取上清液过0.22pm针筒过滤头，滤液供液相

色谱-串联质谱分析［4］。

(2)方法2。取5批次怒江州泸水市老窝乡不同产地的酸木瓜鲜果，去核、粉碎，精密称定5.0g,于50mL具

塞离心管中，加入50mL乙醇，振荡提取20min,8000r离心，将离心液转入100mL鸡心瓶，旋转蒸发到5mL,

过C18固相柱(5mL甲醇，5mL水活化固相柱)，用5%乙醇水冲洗小柱2次，再用6mL正己烷洗脱，收集洗脱

液，50°C氮吹干，准确加入1mL初始流动相溶解，过0.22pm针筒过滤头，滤液供液相色谱-串联质谱分析。

1.3.2标准溶液配制

精密称定熊果酸和齐墩果酸标准品各10.0mg用甲醇定容至10mL,配成1.0mg・mL-1的母液，再用初始流动相

稀释配成0.001、0.01、0.02、0.05、0.1、0.2pgmL-1标准工作液。

2结果与讨论

2.1标准溶液的MRM色谱图

0.02ng-mL-1混合标液的R色谱图，如图1所示。

图10.02ng-mL-1混合标液的R色谱图

2.2标准曲线线性关系与检出限、定量限

将混合标准工作液按1.2中的分析条件进行测定，在1.2色谱条件下依次进样测定，以待测化合物的质量浓度为

横坐标，色谱峰面积为纵坐标，绘制标准工作曲线，计算线性方程和相关系数。该方法熊果酸的线性方程为Fx=3.952

9e+007*x+104321,相关系数为0.9999386；齐墩果酸的线性方程为Fx=3.79790e+007*x+38609.2,相关系数为0.999

1771O熊果酸和齐墩果酸线性范围均为0.001