DB13_T1384.7-2011_饲料中恩诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星的测定_河北省.docxVIP

ICS65.120

DB13

B46

河北省地方标准

DB13/T1384.7—2011

饲料中恩诺沙星、环丙沙星、诺

氟沙星的测定

Determinationofenrofloxacin/ciprofloxacin/norfloxacininfeed

河北省质量技术监督局

发布

DB13/T1384.7—2011

前

言

本标准按照GB/T1.1－2009给出的规则起草。

本标准由河北省质量技术监督局提出。

本标准起草单位：河北省食品质量监督检验研究院、河北省医科大学、北京出入境检验检疫局技术

中心、石家庄市疾病预防控制中心、河北省饲料产品质量监督检验站。

本标准主要起草人：张岩、李挥、吕品、丛斌、卢小宇、张宏、范斌、贾茜、马春玲、米振杰、杨

立学、李志平、沈磊、高振同、武英利。

I

DB13/T1384.7—2011

饲料中恩诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星的测定

1

范围

本标准规定了饲料中恩诺沙星，环丙沙星，诺氟沙星的液相色谱-串联质谱测定方法。

本标准适用于饲料中恩诺沙星，环丙沙星，诺氟沙星的测定。

本标准的方法检出限为10.0μg/kg。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规则和试验方法（GB/T6682－2008，ISO3696:1987,MOD）。

3方法提要

试样加入内标后，氢氧化钠溶液提取，离子化的喹诺酮类药物经过阴离子交换固相萃取柱富集净化，

用液相色谱-质谱/质谱法测定，梯度洗脱，内标法定量。

4.7恩诺沙星、环丙沙星和诺氟沙星标准储备溶液：1mg/mL。准确称取适量的恩诺沙星、环丙沙星

和诺氟沙星标准品，甲醇配成1.0mg/mL的标准储备液。储备液储备在4℃冰箱中，可保存6个月。

4.8恩诺沙星、环丙沙星和诺氟沙星标准工作溶液：用甲醇－水（2＋8，体积比）分别配成浓度范围

为1ng/mL～60ng/mL标准工作溶液，其中内标溶液浓度为50ng/mL，现配。

4.9氘代诺氟沙星（NOR－D5）内标储备溶液：100μg/mL。称取适量的NOR－D5内标物（4.5），

用甲醇（4.1）配成100μg/mL储备液，储备液储存在4℃冰箱中。

4.10氘代诺氟沙星（NOR－D5）内标储备溶液：1μg/mL。取适量的内标储备液（4.8），用甲醇

（4.1）稀释成100μg/mL储备液，内标工作溶液在4℃下保存。

4.11氢氧化钠溶液（0.1mol/L）：取4g氢氧化钠，溶解于1L水中。

4.12甲酸-甲醇溶液（5＋95，体积比）：取5mL甲酸（4.3）于80mL水中，混合均匀。

1

DB13/T1384.7—2011

5仪器和设备

5.1液相色谱-串联质谱仪：配电喷雾粒子源。

5.2分析天平：感量0.001g，0.1mg，各一台。

5.3旋转蒸发仪。

5.4固相萃取装置。

5.5涡旋均混器。

5.6真空泵：真空度不低于80kPa。

5.7滤膜：有机系，0.45μm。

5.8离心管：100mL，具塞。

6试样的制备

6.1提取

准确称取5g样品（精确至0.01g），置于100mL离心管中，加经灼烧的无水硫酸钠，用干净玻

璃棒将样品与无水硫酸钠搅拌分散均匀，准确加入1μg/mL内标溶液50μL，加入20mL氢氧化钠溶

液，于涡旋均匀器上快速混匀。以5000r/min的速度离心5min，上清液移入125mL分液漏斗中，加

20mL正己烷混合，涡漩振荡，静置分层，取下层水相待净化。

6.2净化

依次用3mL甲醇和3mL水活化固相萃取柱，将样品溶液转移到小柱上，依次用水、甲醇淋洗，

弃去上述滤液。用甲酸-甲醇溶液3mL洗脱。40℃水浴旋转蒸发至干，用甲醇-水定容1.0mL,过0.45

μm的滤膜到进样瓶中，供液相色谱-质谱仪测定。

7.1测定

梯度洗脱程序：参见表1。

2

DB13/T1384.7—2011

表1梯度洗脱程序

时间（min）

0

A（％）

10

B（％）

90

90

10

10

90

90

2.00

10

4.00

90

8.00

90

9.00

10

15.00

10

7.1.2参考质谱条件

离子源：电喷雾离子源。

扫描方式：正离子扫描。

检测方式：多