动物细胞培养课件--高二下学期生物人教版选择性必修3.pptxVIP

【本节聚焦】

1.动物细胞培养需要哪些基本条件?

2.动物细胞培养的基本操作过程是什么?

3.怎样客观分析干细胞在临床上的应用所产生的效益与风险?;

科技探索之路：动物细胞工程(含胚胎工程)的发展历程

2014年细胞克隆猴。

2006年获得诱导多能干细胞

克隆羊多莉诞生1996年;

在治疗大面积烧伤时，通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对这样的病人来说，自体健康皮肤非常有限，使用他人皮肤来源又不足，而且会产生免疫排斥反应。那么,怎样才能获得大量的自体健康皮肤?能不能用自体皮肤的单个细胞培养出可供移植的皮肤?

可以从病人身上取少量正常、健康的皮肤在体

外进行培养、扩增；——动物细胞培养

目前，科学家还在研究对皮肤干细胞进行培养，

以获得适合临床上使用的人造皮肤；

干细胞培养;;

一、动物细胞培养的概念和原理

1.概念：从动物体中取出相关的组织，将它分散成_单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。

取出分散成适宜条件

动物体组织单个细胞细胞生长和增殖

2.原理：有丝分裂(细胞增殖)

幼龄动物or老龄动物?为什么?一般取材于动物胚胎或幼龄动物的组织、器官。

细胞分化程度低，分裂能力强，有丝分裂旺盛，容易培养。

3.目的：获得细胞或细胞产物；不能获得完整动物个体

思考：体外培育皮肤细胞实际上是在体外模拟体内的生理条件进行的培养。你还记得为了维持正常的生命活动，机体给细胞提供了哪些适宜的条件吗?;

二、动物细胞培养的条件

思考1:机体给细胞提供了充足的营养和稳定的内环境。体外培养皮肤细胞需要满足什么条件?充足的营养稳定的内环境

通常添加葡萄糖，不包括淀粉、蔗糖等;

②在无菌环境下进行操作

思考2:离体培养的细胞对微生物没有防御能力?如何防止培养过程中的微生物污染

④可添加一定量的抗生素;

3.适宜的温度、pH、渗透压

无菌、无毒的环境

适宜的温度、pH

和渗透压

适宜的气体环境

人体?;

(2)培养工具通常采???培养皿或松盖培养瓶。

置于含有95%空气和5%CO?的混合气体的CO?培养箱中进行培养。;

1.为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞呢?可用什么方法?

2.体外培养动物细胞有哪些类型?

3.什么是细胞贴壁?什么是接触抑制?

4.什么是原代培养和传代培养?

5.为什么要进行分瓶培养?怎么处理?

6.动物细胞培养与植物组织培养有什么相同之处与不同之处?;;

1.取动物组织

(1)对象：一般取动物胚胎或幼龄动物的组织、器官。

(2)原因：细胞分化程度低，增殖能力强，容易培养。

2.分散成单个细胞

(1)原因：①从动物体取出的成块组织中，细胞与细胞靠在一起，彼此限制了生长和增殖。

②利于细胞与培养液充分接触，更易进行物质交换。

(2)方法：用机械的方法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理一段时间。;;

3.制成细胞悬液

方法：用培养液将细胞制成细胞悬液。

4.原代培养

(2)细胞增殖受阻的原因

①悬浮的细胞：会因细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻。

②贴壁细胞：除受上述因素影响外，还会发生接触抑制现象。;;

beng

放入CO?培养箱中

培养

8

传代培养放入CO?培养箱中培养;

5.分瓶、传代培养

(3)收集细胞的方法

①悬浮培养的细胞：直接用离心法收集；

②贴壁细胞：重新用胰蛋白酶等处理，使之分散成单个细胞，然后再用离心法收集。

(4)胰蛋白酶作用

①第一次使用：使组织细胞分散开；;

不行，因为动物细胞培养适宜的PH为7.2~7.4,此环境下胃蛋白

酶(1.5~2.0)没有活性，而胰蛋白酶(7.2~8.4)的活性较高。

2.胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗?为什么?

胰蛋白酶除了可以水解细胞间的蛋白外，长时间的作用也

会水解细胞膜蛋白，对细胞有损伤作用，因此必须控制好胰蛋白酶的处理时间。;

用机械的方法，或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理

分散成单个细胞

加培养液

制成细胞悬液

在培养皿或培养瓶中;

(1)细胞贴壁：细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上

(2)接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞停止分裂增殖的现象。

(3)原代培养：指动物组织经处理后的初次培养。

(4)传代培养：分瓶后的细胞培养。;

随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖

遗传物质有的改变

细胞株

细胞悬浮液10代细