化学发光课件.pptxVIP

CL基本原理A+B=C+D*D*→D+hV（1）能快速地释放出足够能量（化学发光反应多为氧化还原反应，激发能与反应能相当，DE=170～300kJ/mol；发光位于可见光区；（2）化学反应能量最少能被一个物质所接收并使之生成激发态；（3）激发态分子能够以辐射跃迁方式返回基态1/30

CL基本原理在化学发光（chemluminescence,CL）中，由化学反应产生能原子或分子由激发态回到基态时所产生这一光辐射现象叫化学发光。依据化学发光强度测定物质含量分析方法叫化学发光分析。1887年Redziszewski首次报道了络吩碱（lophine,2,4,5-三苯基咪痤）在碱性条件下与氧气反应发出黄金设色光———人为化学发光……2/30

CL基本类型按反应机理本身化学发光、敏化化学发光、电致化学发光本身发光：是指被测物质为反应物直接参加化学反应，利用本身化学反应释放能量激发产物分子光辐射。可用反应式表示为：A+B→C*+D，C*→C+hv这类最普遍，多数有机物分子在液相中化学反应属于这一类型3/30

CL基本类型敏化化学发光是指一些化学反应中因为激发态产物本身不发光或反光十分微弱，但经过加入某种接收体（荧光剂）可造成发光。反应式为：A+B→C*+D,F+C*→F*+C,F*→F+hvC为能量给于体，F为能量接收体4/30

化学发光强度与反应物浓度关系化学发光强度与化学反应速度（dp/dt）相关联，而一切影响反应速度原因多能够作为建立测定方法依据。

化学发光反应普通可表示为：

A+B→C*,C*→C+hv

该发光反应化学发光强度取决于反应速度dp/dt和反应化学发光量子效率（ΦCL）

ICL（T）=ΦCLdp/dt

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惯用化学发光试剂A鲁米诺（luminol）及其衍生物（3—氨基—邻苯甲酰肼）在碱性条件下能被许多氧化剂（比如H2O2,O2,ClO-等）氧化而发出蓝色光，量子产率介于0.01~0.05之间是一个研究最早，最多，应用最广泛发光试剂。pH10-12水溶性好鲁米诺异鲁米诺6/30

惯用化学发光试剂鲁米诺发光原理7/30

鲁米诺与双氧水发光机理异鲁米诺8/30

惯用化学发光试剂B过氧草酸盐（peroxalate）本身并不发光，其化学发光均为敏化发光反应。是芳香草酸盐和H2O2芳香草酸盐和H2O2反应形成高能量中间物。与鲁米诺相比，过氧草酸盐化学反应发光效率更高，可到达27%，且在较宽酸度范围内(pH4~10)都能发光。缺点：水溶性差。适合用于有机相体系。荧光棒9/30

惯用化学发光试剂C吖啶酯在碱性条件下被H2O2氧化时,发出波长为470nm光。10/30

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CL发光效率和发光强度化学效率主要取决于发光所依赖化学反应本身；而发光效率则取决于发光体本身结构和性质，也受环境影响。12/30

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动力学反应时间，提升灵敏度?15/30

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O3,NO,NO2,H2S,SO2,CO18/30

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化学发光在CE中应用柱后套管式柱端液池式电致发光式23/30

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光激发化学发光主要原理是由光激发产生均相化学发光技术。是以纳米级高分子微粒为基础新一代化学发光技术，被广泛地应用于硕士物分子相互作用。Lightinitiatedchemiluminescenceassay,LiCA25/30

光激发化学发光感光化合物感光微粒和含有发光化合物发光微粒组成。微粒直径约188nm，表面覆盖多糖水凝胶。其功效为：非特异性结合少增加微粒悬浮性。连接目标生物分子。增加了反应表面积，可结合成百上千个生物分子60000个/s镧系元素26/30

光激发化学发光特点高灵敏度低背景适用范围广逐层放大化学反应结果。感光微粒富含感光化合物，在光照射后每个微粒会释放出60000个/s离子氧，离子氧作用于发光微粒中二甲基噻吩衍生物产生大量紫外光完成第二级放大；紫外光激发包埋在发光微粒中镧系元素释放光能完成第三级放大过程。三级梯度放大过程使LiCA检测限低至10-15摩尔。27/30

光激发化学发光特点高灵敏度低本底适用范围广1.天然荧光寿命小，而发光微粒发光时间超出1秒，可采取时间分辨模式采集光信号，也就是在激光器关闭后50-100毫