【】2021高考生物（苏教版）一轮配套文档：第40讲 无菌操作技术实践.DOCVIP

1．涵盖范围

本单元包括选修1全部内容——无菌操作技术实践、发酵技术实践、酶的应用技术实践和生物化学与分子生物技术实践。

2．考查内容及形式

(1)微生物的培育与应用多以简答题形式考查。

(2)酶的应用，常与必修1中酶的本质、特性等学问有机结合考查。

(3)植物的组织培育技术常与植物有效成分提取相结合考查。

(4)发酵技术实践应用多以简答题形式考查。

(5)酶的应用、生物化学与分子生物学技术多以选择题形式考查。

3．复习指导

(1)复习线索

①以转基因——微生物培育——酶生产——酶应用为线索，系统复习微生物的分别与培育、酶的应用技术实践。

②以技术手段、技术流程为主线，复习发酵、组织培育、有效成分及DNA、蛋白质等有关学问。

(2)复习方法

①列表比较法——DNA、蛋白质的分别。

②实践联系——发酵技术、植物有效成分提取技术。

③试验联系——植物组织培育、微生物培育试验过程。

第40讲无菌操作技术实践

[考纲要求]1.微生物的分别和培育。2.某种微生物数量的测定。3.培育基对微生物的选择利用。4.植物的组织培育。

考点一微生物培育基的配制、无菌操作和接种技术[重要程度：★★☆☆☆]

1．培育基的定义及分类

(1)概念：为人工培育微生物而制备的适合微生物生长、繁殖或积累代谢产物的养分基质。

(2)养分成分：碳源、氮源、水、无机盐等。

(3)分类：按所含化学成分，培育基可分为自然?培育基和固体培育基。

2．无菌操作与接种技术

(1)灭菌和消毒

①灭菌是指接受猛烈的物理学或化学方法使物体内外全部的微生物永久丢失生长和繁殖力气的方法。②消毒：用较为温存的物理学方法或化学方法杀灭物体上绝大多数微生物的方法。

(2)灭菌的方法：干热灭菌或湿热灭菌(如高压蒸汽灭菌等)。

(3)无菌操作——微生物接种技术的关键

①培育基、试管、培育皿、接种器械在接种前都需要灭菌。

②操作人员及操作环境要求消毒。

(4)接种技术

划线接种

平板划线法

斜面划线法：主要用于试管中的斜面培育基

涂抹平板接种

涂抹平板法：用无菌玻璃刮铲将菌种涂在培育基表面

混合平板法：将菌种混合于培育基中倒平板

穿刺接种

用带有菌种的接种针垂直刺入培育基后拔出

3．培育基的配制

(1)配制原则：为所培育微生物的生长和繁殖或积累代谢产物供应所需的养分基质。

(2)配制过程(以大肠杆菌的接种与分别为例)：配制培育液―→调整pH―→分装―→包扎―→灭菌―→搁置斜面。

1．消毒和灭菌的不同点

比较项目

理化因素的作用强度

毁灭微生物的数量

芽孢和孢子能否被毁灭

消毒

较为温存

部分生活状态的微生物

不能

灭菌

猛烈

全部微生物

能

2．涂抹平板法和混合平板法的异同

(1)过程如图

(2)结果不同

①涂抹平板法：细菌菌落通常仅在平板表面生长。

②混合平板法：细菌菌落毁灭在平板表面及内部。

(3)目的相同：分别各种目的微生物。

易错警示(1)平板分别法是微生物分别的最常用方法，其中涂抹平板法和混合平板法可定量地测定微生物。

(2)倒平板的适宜温度是50℃

(3)平板需倒置，这样既可使培育基表面的水分更好地挥发，又可防止皿盖上的水珠落入培育基，造成污染。

1．下列有关微生物培育与应用的说法，正确的是 ()

A．自然?培育基是指直接取自自然界不需加工的培育基

B．接种前需对培育基、培育皿、接种环、试验操作者的双手等进行严格的灭菌处理

C．大肠杆菌的纯化培育过程包括培育基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段

D．分别分解尿素的细菌时，尿素是培育基中唯一的氮源和碳源

答案C

解析自然?培育基是成分不明确的培育基，并不是不需加工配制的培育基；试验者的双手需进行消毒处理；分别分解尿素的细菌时，尿素是唯一的氮源而不是唯一的碳源。

2．有些细菌可分解原油，从而消退由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题：

(1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以________为唯一碳源的固体培育基上。从功能上讲，该培育基属于________培育基。

(2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常接受的接种方法有两种，即__________________和

______________________。

(3)为了筛选出高效菌株，可比较单菌落四周分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解力气__________________。

(4)通常状况下，在微生物培育过程中，试验室常用的灭菌方法有__________和_________等。无菌技术要求试验操作应在酒精灯________四周进行，以避开四周环境中微生物的污染。

答案(1)原油选择(2)平板划线法涂抹平板法

(3)强(4)干热灭菌高压蒸汽灭菌火焰

解析(1)可以将所需要的