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6.7.2前体饲喂在药用植物组织培养中,通过加入次生代谢物合成的前体物质来提高细胞中有效组分的含量。次生代谢物的形成主要依赖于3种结构单位的供应:莽草酸:芳香类化合物的前体氨基酸:生物碱及肽类的前体乙酸:多酚类,类异戊二烯,大环抗生素类,前列腺素类的前体*基本出发点:在细胞外创造一个次级代谢产物的贮存单元。6.7.3两相法培养加入固相或疏水液相,形成两相培养系统,达到收集分泌物的目的。可减轻产物本身对细胞代谢的抑制作用,并可保护产物免受培养基中催化酶或酸的影响。产物在固相或疏水相中积累简化了下游处理过程,可大幅度降低生产成本。*添加的固相或液相对细胞无毒害产物易被固相吸附或被有机相溶解两相易分离如为固相,不可吸附培养基中的添加成分两相培养系统必须满足的条件:*冠瘿组织和和毛状根培养技术: 根瘤农杆菌和发根农杆菌的原生质体中含有Ti质粒和Ri质粒,感染植物组织后,农杆菌将质粒中的一段DNA整合到植物细胞中,从被感染处长出冠瘿瘤和毛状根。该组织具有增殖速度快等特点,可进行有用化合物的生产。6.7.4转基因技术在次级代谢产物生产中的应用**6.7.5植物生物转化技术与生物制药(1)概述①定义生物转化:也称生物催化,指利用生物离体培养细胞或器官及细胞器对外源化合物进行结构修饰而获得有价值产物的生理生化反应,其本质是利用生物体系本身所产生的酶对外源化合物进行酶催化反应。*作为生,植物细胞培养具有下列优点:可以在实验室中生长,实验重现性好细胞可以无限生长,培养物可以大量累积,源源不断的提供生物材料。物催化剂生长循环周期短,利于实验进行。②生物转化的优点* 一植物生物转化的优点植物中具有许多微生物中不存在的独特酶,可以催化一定的反应生成许多复杂的化合物甚至是新化合物;而用化学合成的方法合这些化合物步骤烦琐且价格昂贵。*改造已有的化合物产生新化合物增加目标产物的产量条件温和,副产物少,耗能少,安全,减少开支克服化学合成的缺点有助于阐明化合物的生物合成途径还可与有机合成结合使用③植物生物转化的意义*有些物质难溶或不溶于水,因此其转化速率非常低。引入环糊精可以使这些物质在水中的溶解性改善,更容易进行转化。一些重要的生物转化类型:羟基化、糖基化、醇和酮的氧化还原反应、水解反应、环氧化作用、羰基还原反应、碳碳双键的还原反应、硝基还原反应。(2)植物细胞和器官培养物的生物转化*固定化植物细胞培养生物转化外源底物具有的优势:细胞抗剪切能力增强;可以长期重复使用;可能产生较多的生物材料,从而转化更多底物;细胞的恢复更容易;产品后期化学处理更容易。(3)利用固定化细胞培养进行生物转化*(4)基因工程方法在生物转化中的应用关键酶基因转入微生物侵染植物细胞关键酶表达转化外源底物得到新化合物(5)利用植物酶进行生物转化木瓜蛋白酶、环化酶、酚氧化酶、卤化过氧化酶等*6.7小结(进展与前景)1.诱导子在植物细胞工程研究中的应用2.前体饲喂:是增加次级代谢产率的重要方法3.两相法培养4.转基因技术在次级代谢产物生产中的应用5.植物生物转化技术与生物制药*第六章思考题植物无菌培养技术分为几类?植物细胞培养所用的培养基由哪些主要成分组成?植物生长素和分裂素在植物组织和细胞培养过程的用途?影响植物次级代谢产物累积的因素有哪些?植物细胞大规模培养的主要方法及其特点是什么?各种植物细胞培养的生物反应器的特点是什么?植物细胞培养有哪些新技术?*讨论:①利用植物组织和细胞培养技术生产药用成分有哪些优点?②作为药物生产的细胞,植物细胞与微生物细胞和动物细胞相比有什么独特之处?③植物培养细胞的主要特征有哪些?推荐阅读:3篇文章,p231*植物细胞培养的实例(一)三七细胞培养工艺(二)西洋参细胞培养工艺*(一)三七细胞培养工艺1、制备培养基2、三七种质材料的选择和处理3、愈伤组织诱导及培养4、细胞悬浮培养5、三七细胞工程化大量培养6、细胞收集以及干燥
*二、填空1.植物细胞培养的最适温度是——,光照以每天——为宜。2.日本科学家成功开发的第一个植物细胞工程商品是——。三、名词解释成批培养法连续培养法四、问答植物细胞培养
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