贺兰山东麓葡萄酒中原花青素的测定 液相色谱法（征求意见稿).pdfVIP

ICS67.050

B20

团体标准

T/NAIAXXX—2022

贺兰山东麓葡萄酒中原花青素的测定

液相色谱法

DeterminationofproanthocyanidinsinHelanMountainwine

byliquidchromatography

2022-XX-XX发布2022-XX-XX实施

宁夏化学分析测试协会发布

T/NAIAXXX—2022

贺兰山东麓葡萄酒中原花青素的测定液相色谱法

1范围

本标准规定了贺兰山东麓葡萄酒中原花青素含量测定的高效液相色谱的方法。

本标准适用于贺兰山东麓葡萄酒（包括白葡萄酒、红葡萄酒）中原花青素的测定。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本

文件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法

GB/T22244-2008保健食品中前花青素的测定

DB65/T4039-2017黑果枸杞原花青素含量得测定液相色谱法

3原理

试样经乙酸乙酯提取，旋蒸浓缩至干，以甲醇定容，应用高效液相色谱法测定，经C色谱柱

18

分离，以保留时间定性，外标法定量。

4试剂和材料

本方法所用的试剂，除另有规定外，均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

4.1试剂

4.1.1甲醇:色谱纯。

4.1.2乙酸乙酯：色谱纯。

4.2标准品

4.2.1原花青素标准品：纯度≥98%。

4.2.2原花青素标准溶液（1.0mg/mL）：称取0.01g原花青素标准品（精确至0.001g），用甲醇

溶解定容至10mL棕色容量瓶中，此溶液临用现配。

4.2.3原花青素标准工作液：根据需要，用甲醇配制适当浓度的标准工作液，现用现配。

5仪器和设备

5.1高效液相色谱仪：配有二极管阵列检测器。

5.2旋转蒸发仪。

5.3超声波清洗器。

5.4分析天平：感量0.1mg和0.01g。

5.5离心机：最大转速10000r/min。

5.6纯水仪。

T/NAIAXXX—2022

5.7涡旋混合器。

6分析步骤

6.1试样制备

将所取原始样品1kg在瓷混样桶内充分混匀，将混匀样品置于洁净容器内密封，作为试样，并

标明标记。

6.2试样的提取

准确称取10g（精确到0.01g）试样于50mL聚四氟乙烯离心管内，分别加入20mL乙酸乙酯，

涡旋混匀1min，超声提取10min后，5000r/min离心5min，取上层全部提取液转移至鸡形瓶中，重

复上述操作，合并两次提取液，40℃旋转浓缩至近干，用甲醇溶解并定容至10mL，取1mL样液经

0.22μm微孔滤膜过滤，待液相分析。

6.3仪器参考条件

6.3.1液相色谱参考条件

6.3.1.1色谱柱：C柱（250mm×4.6mm，粒径5μm），或性能相当者。

18

6.3.1.2流动相：A为V（水）：V（乙酸）98%：2%，B为乙腈，梯度洗脱条件见表1。

6.3.1.3检测波长：280nm。

6.3.1.4柱温：30℃。

6.3.1.5进样量：10μL。

表1流动相及梯度洗脱条件

时间/min流速/(mL/min)流动相A/%流动相B/%

0