仿抗菌肽型氨基酸衍生物抗菌...水凝胶的合成与抗菌性能研究.pdfVIP

仿抗菌肽型氨基酸衍生物抗菌剂及其水凝胶的合成与抗菌性能研究

摘要

抗菌肽作为一种膜活性的新型抗菌剂对于解决微生物耐药性问题具有重要意义。然

而，抗菌肽存在稳定性差、制备难度大、价格昂贵等不足，阻碍了其在临床中的应用。

因此，科研学者开发了仿抗菌肽结构的肽模拟物，其中氨基酸衍生的肽模拟物具有抗菌

活性高、不易诱发耐药性、生物相容性好及成本低等优势，已成为生物医药领域新的研

究热点。然而当前关于氨基酸衍生肽模拟物的研究尚处于初期阶段，类型有限，成药性

低、功能较单一、成本较高，尤其是氨基酸衍生肽模拟物的分子结构对其抗菌活性的影

响尚未明确，其严重限制了新型高性能氨基酸衍生肽模拟物的设计及开发。本文针对上

述问题，基于阳离子/疏水平衡原则，从改变分子结构的角度设计合成了一系列新型氨基

酸衍生抗菌肽模拟物，探究了阳离子肽模拟物分子结构对抗菌活性的影响。之后基于所

设计的抗菌肽模拟物，构建了两种星型聚醚酰胺交联的抗菌水凝胶材料，为抗菌肽模拟

物在材料领域的抗菌应用提供了技术储备和数据支撑。取得了如下研究成果：

从结构设计角度，设计合成了一系列新型的含不同长度烷基（丁基至十六烷基）和

氨基酸残基的氨基酸烷酰胺，研究了长链疏水性对抗菌活性的影响规律并总结了构效关

系。结果表明，氨基酸烷酰胺的疏水性与抗菌活性呈抛物线关系，最佳抗菌活性对应的

链长为十二烷基。筛选出的十二烷基缬氨酸衍生物A-V-C12能够有效杀死普通细菌，同

时对耐甲氧西林葡萄球菌（MRSA）也具有优异的抗菌活性，最小抑菌浓度（MIC）为

8.3μg/mL，并且表现出良好的血液相容性和低细胞毒性。此外，耐药倾向实验也证实了

氨基酸烷酰胺的低耐药倾向。

基于苯环刚性共轭的优势骨架，设计合成了一系列新型的阳离子氨基酸苯基酰胺。

评价其抗菌活性并给出苯环骨架中取代基对抗菌活性的影响规律，即乙炔基共轭结构取

代基能够显著提高抗菌活性。筛选出的氨基酸苯基酰胺P-V-18（含有L-缬氨酸残基与

对乙炔苯甲酰胺取代基）对耐药性细菌MRSA的MIC值为5μg/mL。P-V-18具有杀菌

速度快（浓度为4倍的MIC时，1h内杀死超过99.6%的测试细菌）、溶血活性低（半数

抑制浓度HC50=891μg/mL）、细胞毒性低等优势。抗菌机制研究表明P-V-18通过破坏

细胞膜的完整性发挥抗菌活性。同时，耐药倾向研究证实了P-V-18不会诱导细菌产生

耐药性，因此其能够作为新型抗菌剂用来对抗细菌耐药性。

基于三维拓扑结构设计，利用星型结构的聚醚胺T403与氨基酸进行缩合反应，合

成了一系列星型氨基酸聚醚酰胺。评价了星型氨基酸聚醚酰胺对医院感染性细菌和耐药

哈尔滨工程大学博士学位论文

细菌的抗菌活性，并总结了氨基酸种类和构型与抗菌活性的关系。结果表明，色氨酸聚

醚酰胺（T-W-29）抗菌活性最强，其对医院感染性细菌的MIC值为0.5~8µg/mL。在哺

乳动物体液中，T-W-29对大肠杆菌的MIC值仅为2.8µg/mL，具有优异的体液稳定性。

T-W-29还具有快速清除成熟生物膜的能力，其在256µg/mL浓度时清除了95.5%的大

肠杆菌生物膜。流式细胞术、离子检测及微观组织表征结果表明氨基酸聚醚酰胺能够引

起细菌的细胞膜裂解和DNA泄露。此外，氨基酸聚醚酰胺还表现出低溶血活性、低体

外/体内毒性的优点，具有成为新型抗菌剂的潜力。

在此基础上，开展了星型氨基酸聚醚酰胺在水凝胶材料中的抗菌应用研究。首先，

设计了一种快速自修复且具有良好机械性能的赖氨酸聚醚酰胺/聚丙烯酸抗菌水凝胶。该

水凝胶能够在8h内杀死几乎全部的黏附细菌，并且其抗菌性能可以持续超过7天，表

现出长期稳定的抗菌活性。此外，该水凝胶具有良好的力学性能及自修复能力，其断裂

伸长率达到了758%，并且在自修复30min后断裂伸长率恢复到原始水凝胶的98.7%。

此后，基于酪氨酸聚醚酰胺固有的抗菌优势，将酪氨酸聚醚酰胺与聚乙烯醇及具有导电

和自粘性的聚多巴胺共混，制备了一种兼具抗菌能力及人体健康检测功能的电子皮肤材

料。该材料具有良好的导电性，可以作为传感器成功地检测人体的宏观（行走、奔跑等）

和微观（吞咽、脉搏跳动等）运动，并且在没有外力干扰的情况下1s内就实现快速自

修复。该