微生物的培养技术及应用（第2课时）高二下学期生物人教版选择性必修3.pptxVIP

高二下学期生物人教版选择性必修3

第1章发酵工程

第2节微生物的培养技术及应用

第2课时微生物的选择培养和计数;

预习梳理

一、选择培养基

1.概念：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。;

预习梳理

2.菌株的筛选

(1)自然界中：根据目的菌株对生存环境的要求，到相应环境中去寻找。实例：聚合酶链式反应(PCR)中用到的耐高温的DNA聚合酶，就是从热泉中筛选出的水生栖热菌中提取出来的。(筛选依据：水生栖热菌能在70～80℃的高温条件下生存，而绝大多数微生物在此条件

下不能生存。)

(2)实验室中人为提供有利于目的菌生长的条件(包括营养、温度和pH等),同时抑制或阻止其他微生物的生长。;

二、微生物的选择培养

思路：对土样进行充分稀释，再将菌液涂布到制备好的选择培养基上，待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板倒置。在涂布有合适浓度菌液的平板上就可以观察到分离的单菌落。;

三、微生物的数量测定

1.稀释涂布平板法

当样品的稀释度_足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。

2.显微镜直接计数法

用特定的细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下观察、计数，

然后再计算一定体积的样品中微生物的数量。;

KH?PO?;

任务活动

(2)该培养基中作为碳源的物质是甘露醇，利用该培养基能分离出固氮微生物，原因是该培养基中无氮源，固氮菌能利用空气中的

氮气来生长繁殖，没有固氮能力的微生物的生长会受到抑制。

(3)在配制培养基时需要添加KH?PO?等，其作用是为细菌生长提供无

机盐，还能维持培养过程中pH的相对稳定。;

归纳拓展

1.选择培养基的类型

(1)利用营养缺陷型选择培养基进行的选择培养：通过控制培养基的营养成分，使营养缺陷型微生物不能正常生长。

(2)利用化学物质进行的选择培养：在完全培养基中加入某些化学物质，利用加入的化学物质抑制某些微生物的生长来选择所需的微生??。

(3)利用培养条件进行的选择培养：改变微生物的培养条件(如高温、pH等),筛选特定微生物。;

选择培养

基;

反馈评价

例1[2024·湖北襄阳期中]在微生物学中，我们通常根据不同微生物各

自的特性，采取不同的培养条件，下列有关细菌培养的叙述，正确的是()

A.不同细菌的菌落特征一般相同

B.在培养基中加入青霉素可促进细菌生长

C.用液体培养基培养破伤风杆菌的过程中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长

D.培养醋酸菌时，往培养液中通入氧气可以促进菌体快速增殖;

任务活动

[解析]不同细菌的菌落特征一般不同，A错误；在培养基中加入青霉素

会杀灭细菌，B错误；破伤风杆菌是厌氧细菌，因此用液体培养基培养破

伤风杆菌的过程中通氧气会抑制其生长，C错误；醋酸菌是好氧细菌，因此培养醋酸菌时，往培养液中通入氧气可以促进菌体快速繁殖，D正确。;

例2[2023·广东卷]研究者拟从堆肥中取样并筛选能高效降解羽毛、

蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌。根据堆肥温度变化曲线(如图)和选择培养基筛选原理来判断，下列最可能筛选到目标菌的条件组合是;

任务活动

[解析]研究目的是要筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白

的嗜热菌，因此目的菌要既能耐热，又能分解角蛋白，故应在c点时

取样，且使用角蛋白氮源培养基进行选择培养。;

任务二微生物的选择培养与数量测定

【资料一】阅读教材第17页“稀释涂布平板法操作示意图”。

(1)请补充相关内容

取样：铲取土样，将样品装入纸袋中

个

①将10g土样加入盛有90_mL

无菌水的锥形瓶中，充分摇匀

等比稀释②取1mL上清液加入盛有9_mL

无菌水的试管中

③依次等比稀释;

任务活动

滴加菌液：取0.1mL菌液，滴加到培养基表面

①将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中

涂布器灭菌②将涂布器放在火焰上灼烧，

待酒精燃尽、涂布器冷却后，再进行涂布

涂布平板用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时，

可转动培养皿，使涂布均匀;

任务活动

(2)要想得到某种特定细菌的纯培养物，上述过程使用的培养基，从功能角度看，为选择培养基。

(3)铲取土样过程所用的铲子和纸袋要进行灭菌处理。

(4)样品的等比稀释过程中，需要_(填“需要”或“不需要”)更换移液管。要等涂布器冷却后才能进行涂布操作，原因是避免高温杀死微生物。

(5)本实验需要设置对照吗?如果需要，应如何设置?

[答案]需要，将接