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学而不思则罔思而不学则殆第一章高效液相色谱分析法Highperformanceliquidchromatograph

第一节高效液相色谱的特点与仪器featureandinstrumentofHPLC一二三高效液相色谱仪HPLC高校液相色谱法的特点featureofHPLC流程及主要部件generalprocessandmainassemblyofHPLC

一、液相色谱仪器

highperformanceliquidchromatograph

二、高效液相色谱法的特点

featureofHPLC特点:高压、高效、高速高沸点、热不稳定有机及生化试样的高效分离分析方法。

三、流程及主要部件

processandmainassemblyofHPLC1.流程

三、流程及主要部件

processandmainassemblyofHPLC2.主要部件(1)高压输液泵主要部件之一,压力:150~350×105Pa。为了获得高柱效而使用粒度很小的固定相(10μm),液体的流动相高速通过时,将产生很高的压力,因此高压、高速是高效液相色谱的特点之一。应具有压力平稳、脉冲小、流量稳定可调、耐腐蚀等特性

三、流程及主要部件

processandmainassemblyofHPLC2.主要部件(2)进样装置流路中为高压力工作状态,通常使用耐高压的六通阀进样装置,其结构如图所示:

三、流程及主要部件

processandmainassemblyofHPLC2.主要部件(3)高效分离柱柱体为直型不锈钢管,内径1~6mm,柱长5~40cm。发展趋势是减小填料粒度和柱径以提高柱效。

三、流程及主要部件

processandmainassemblyofHPLC2.主要部件(4)液相色谱检测器a.紫外检测器应用最广,对大部分有机化合物有响应。特点:灵敏度高;线形范围高;对流动相的流速和温度变化不敏感;波长可选,易于操作;可用于梯度洗脱。

三、流程及主要部件

processandmainassemblyofHPLC2.主要部件(4)液相色谱检测器b.光电二极管阵列检测器紫外检测器的重要进展;光电二极管阵列检测器:1024个二极管阵列,各检测特定波长,计算机快速处理,三维立体谱图,如图所示。

三、流程及主要部件

processandmainassemblyofHPLC2.主要部件(4)液相色谱检测器c.示差折光检测器除紫外检测器之外应用最多的检测器;灵敏度低、对温度敏感、不能用于梯度洗脱

三、流程及主要部件

processandmainassemblyofHPLC2.主要部件(4)液相色谱检测器d.荧光检测器高灵敏度、高选择性;对多环芳烃,维生素B、黄曲霉素、卟啉类化合物、农药、药物、氨基酸、甾类化合物等有响应;

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