DB15T+4029-2025FDIS辣椒黄萎病抗性室内鉴定技术规程.docx

ICS65.020.01CCSB21

15

内蒙古自治区地方标准

DB15/T4029—2025

辣椒黄萎病抗性室内鉴定技术规程

Technicalcodeofpracticeindoorresistanceidentificationof

pepperaginstverticilliumwilt

2025-05-16发布2025-06-16实施

内蒙古自治区市场监督管理局发布

DB15/T4029—2025

I

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

本文件由内蒙古自治区果蔬标准化技术委员会（SAM/TC25）归口。

本文件起草单位：内蒙古自治区农牧业科学院、巴彦淖尔市农牧业科学研究所、内蒙古自治区农牧业技术推广中心、乌拉特前旗农牧业综合行政执法大队。

本文件主要起草人：康立茹、杨志刚、常海文、张鹏程、彭月、于传宗、张俊、王永、韩凤英、王治宇、胡栓红、卫志刚、靳慧瑶、王喜旺、董婧、潘璐。

DB15/T4029—2025

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辣椒黄萎病抗性室内鉴定技术规程

1范围

本文件规定了辣椒黄萎病室内鉴定所需接种体制备方法、病情调查方法、抗性鉴定评价方法以及记载表格等内容。

本文件适用于辣椒种质资源在室内条件下对黄萎病抗性水平的鉴定。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

NY/T2312茄果类蔬菜穴盘育苗技术规程

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4材料准备

4,1培养基制备

马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PotatoDextroseAgar，PDA）：称取去皮马铃薯200g，切成约1cm3小块，加入900mL蒸馏水煮沸至薯块轻戳即碎即可（约需20min～30min），三层纱布过滤，加入葡萄糖20g、琼脂18g，加水定容至1000mL，121℃高压蒸汽灭菌25min，冷却备用。

查比克培养基（Czapek，CDB）：3gNaNO3、1gK2HPO4、0.5gKCl、0.5gMgSO4·7H2O、0.01gFeSO4、30g蔗糖，蒸馏水定容至1000mL，121℃高压蒸汽灭菌25min，冷却备用。

麦麸培养基：麦麸中加入适量的水，使其刚好成团，装入250mL灭菌瓶，装至2/3体积处。121℃高压蒸汽灭菌45min，冷却备用。

4.2病原菌准备

4.2.1病原菌获得

采用常规组织分离法，在发病辣椒茎基部维管束组织部位，经分离鉴定获得黄萎病病原菌大丽轮枝菌（Verticilliumdahliae），中等致病力。

4.2.2病原菌活化

病原菌于PDA培养基活化后，再转接至新的PDA培养基中，暗培养20d后备用。

4.2.3分生孢子液制备

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病原菌于PDA培养基中活化培养1～2次后，用灭菌的手术刀将表面长满病原菌的PDA培养基切成碎块，置于200mLCDB培养基中（PDA培养基和CDB培养基均需加入卡那霉素，浓度为50mg·L-1），黑暗条件下，25℃、220r·min-1震荡培养2d～3d后，取分生孢子液5mL～10mL接种到灭菌的麦麸培养基中进行促孢培养，期间进行摇匀。3d～5d后待菌丝长满瓶后，用无菌水冲洗麦麸，双层纱布过滤，调整分生孢子液浓度为1×107个·mL-1备用。

4.3鉴定材料准备

4.3.1对照品种选择

感病品种：“茄门椒”。

抗病品种：“北星八号”。

4.3.2鉴定材料种植

鉴定材料育苗方法按照NY/T2312的规定执行。辣椒幼苗6～8片真叶、株高15cm即可用于接种。

5室内抗性鉴定

5.1接种方法

辣椒幼苗移栽至新的苗钵中，苗钵大小15cm×15cm，移栽后沿茎基部浇灌制备好的分生孢子液

25mL，再浇透水（以苗钵底部不滴水为宜）。每个处理接种10株，重复3次。

5.2接种后管理

接种后辣椒幼苗于室内缓苗2d后，置于日光温室中培养，接种后30d统计发病情况。

5.3病情调查

辣椒黄萎病发病程度分级如下：1级，健株，植株叶片无褪绿及枯死症状，代表值0；2级，植株叶片表现褪绿，低于2