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蛋白质提取分离纯化技术进展
目录
一、内容简述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4
1.1研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4
1.2蛋白质组学的发展需求．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5
1.3蛋白质分离纯化技术的核心目标．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9
二、蛋白质提取技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10
2.1组织/细胞裂解方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10
2.1.1机械破碎策略．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12
2.1.2化学裂解途径．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13
2.1.3生物酶解手段．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14
2.1.4超声波与高压处理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17
2.2提取介质与添加剂．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18
2.2.1盐浓度与类型的选择．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19
2.2.2非离子去污剂的应用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21
2.2.3抑制剂与稳定剂的加入．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23
2.3提取优化与影响因素．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24
2.3.1pH值与温度调控．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28
2.3.2细胞壁/膜通透性增强．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29
2.3.3特定蛋白提取挑战．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30
三、蛋白质分离技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32
3.1依据分子大小与形状的分离．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32
3.1.1凝胶过滤层析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33
3.1.2介质吸附与离子交换．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37
3.1.3速度区带离心．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．38
3.2依据电荷性质的分离．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39
3.2.1等电聚焦．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．40
3.2.2电泳技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．41
3.3依据特定结合特性的分离．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．43
3.3.1亲和层析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．49
3.3.2金属离子交换．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．50
3.3.3介导吸附．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．51
3.4新型分离模式与材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．53
3.4.1微流控芯片技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．54
3.4.2磁性纳米材料吸附．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．55
3.4.3聚合物与凝胶技术进展．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．58
四、蛋白质纯化技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．60
4.1纯化策略与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．61
4.1.1单步纯化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．62
4.1.2多步纯化串联
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