3.1重组DNA技术的基本工具课件-高二下学期生物人教版选择性必修3.pptxVIP

第3章第1节

重组DNA技术的基本工具一/限制性内切核酸酶—“分子手术刀”1/DNA连接酶—“分子缝合针”2/基因进入受体细胞的载体—“分子运输车”3/DNA粗提取和鉴定探究.实践

实现这一精确的操作过程至少需要三种“分子工具”，即准确切割DNA分子的“分子手术刀”、将DNA片段再连接起来的“分子缝合针”和将体外重组好的DNA分子导入受体细胞的“分子运输车”。

旧知重拾1.DNA的结构脱氧核苷酸脱氧核苷酸

旧知重拾1.DNA的结构1′2′4′5′3′磷酸基团脱氧核糖含氮碱基

旧知重拾1.DNA的结构DNA平面结构图DNA立体结构图TCGATGGTCTCAGCTACCAGAG

旧知重拾1.DNA的结构DNA平面结构图①DNA的骨架：脱氧核糖和磷酸交替排列在外侧②内侧：碱基配对，通过氢键连接③配对方式：AT、GC，A和T两个氢键，G和C三个氢键④G、C比例越大，DNA相对越稳定

旧知重拾2.关于基因TCGATGGTCTCAGCTACCAGAGTCGATGGTCTCAGCTACCAGAG.............概念：基因通常是有遗传效应的DNA片段BY3’5’5’3’

旧知重拾2.关于基因概念：基因通常是有遗传效应的DNA片段生物以DNA为遗传物质（RNA病毒除外）.DNA的基本组成单位相同（都是四种脱氧核苷酸）.都遵循碱基互补配对原则.不同生物的DNA都具有相同的双螺旋结构.以碱基排列顺序储存遗传信息为不同来源的DNA片段拼接提供了理论依据

旧知重拾3.关于基因和蛋白质的关系

旧知重拾3.关于基因和蛋白质的关系生物都遵循中心法则：DNA能够自我复制，复制方式相同为外源DNA在细胞中稳定存在提供了理论依据

旧知重拾3.关于基因和蛋白质的关系生物都遵循中心法则：几乎一切生物共用一套遗传密码（密码子相同）为外源基因的表达提供了理论依据

旧知重拾3.关于基因和蛋白质的关系生物通过蛋白质控制性状：.基因控制蛋白质的结构直接控制生物体的性状.基因控制酶的合成来控制代谢过程进而控制生物体的性状

一限制性内切核酸酶-”分子手术刀“任务一：阅读教材P71关于限制性内切核酸酶-”分子手术刀“，回答下列问题。1.切割DNA分子的工具是什么？2.”分子手术刀“从什么生物中分离纯化出来的？3.限制性内切核酸酶识别的对象是什么？切割的化学键是什么？4.切割后产生的末端有哪些类型？5.请根据限制性内切核酸酶名字猜测它可以从DNA的两端切割DNA吗？

一1.切割DNA分子的工具是什么2.”分子手术刀“从什么生物中分离纯化出来的？限制性内切核酸酶（限制酶）主要是从原核生物（细菌等）中分离纯化出来的任务一：阅读教材P71关于限制性内切核酸酶-”分子手术刀“，回答下列问题。它能破坏外源DNA，如侵染细菌的噬菌体DNA，“限制”病毒在细菌内的寄生，而细菌自身DNA经过相应的化学修饰则不会被限制酶破坏。限制酶的保护作用是细菌等进化出的一种防御机制限制性内切核酸酶-”分子手术刀“

一3.限制性内切核酸酶识别的对象是什么？切割的化学键是什么？能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开任务一：阅读教材P71关于限制性内切核酸酶-”分子手术刀“，回答下列问题。例如，EcoRⅠ限制酶的识别序列为从5’→3’方向的识别序列均为GAATTC，并切断G和A之间的磷酸二酯键5’3’5’3’中轴线限制性内切核酸酶-”分子手术刀“

一5’3’5’3’从5’→3’方向的识别序列均为GAATTC，并切断G和A之间的磷酸二酯键3’5’5’3’黏性末端黏性末端当限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA分子的两条链分别切开时，产生的是黏性末端；注意：限制酶切割磷酸二酯键后氢键会自动断裂！例如，EcoRⅠ限制酶的识别序列为任务一：阅读教材P71关于限制性内切核酸酶-”分子手术刀“，回答下列问题。限制性内切核酸酶-”分子手术刀“

一4.切割后产生的末端有哪些类型？黏性末端任务一：阅读教材P71关于限制性内切核酸酶-”分子手术刀“，回答下列问题。例如，SmaⅠ限制酶的识别序列为从5’→3’方向的识别序列均为CCCGGG，并切断C和G之间的磷酸二酯键5’3’5’3’中轴线限制性内切核酸酶-”分子手术刀“

一4.切割后产生的末端有哪些类型？黏性末端任务一：阅读教材P71关于限制性内切核酸酶-”分子手术刀“，回答下列问题。例如，SmaⅠ限制酶的识别序列为从5’→3’方向的识别序列均为CCCGGG，并切断C和G之间的磷酸二酯键5’3’5’3’平末端当限制酶在它识别序列的中心轴线处切开时，产生的是平末端。3’5’5’3’平末端限制性内切核酸酶-”分子手术刀“

一任务一：阅读教材P71关于限制性内切核酸酶-”分子