高二生物基因工程的基本操作程序.pptxVIP

1．2基因工程的基本操作程序

阐述基因工程的原理。掌握并理解基因工程的基本操作程序。尝试设计某一转基因生物的研制过程。【重点】基因工程的原理及基本操作程序。【难点】基因文库；PCK扩增过程；目的基因的检测。课标领航

看到这幅图，联系基因工程，你有何感想？让植物和动物合为一体可能不好实现，但我们能不能通过基因工程技术，让这一愿望实现呢？实际上，基因工程技术已经实现了人们的许多看似异想天开的愿望或构想。情景导航

核心要点突破基础自主梳理知能过关演练1．2基因工程的基本操作程序

基础自主梳理一、基因工程的基本操作程序1．目的基因的获取。2．______________的构建。3．将目的基因导入_________。4．目的基因的检测与鉴定。基因表达载体受体细胞

蛋白质DNA目的基因：主要是指编码________的结构基因。获取方法二、目的基因的获取1(1)从基因文库中获取基因文库：将含有某种生物不同基因的许多______片段，导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因。2

所有

怎样从基因文库中得到我们需要的目的基因？【提示】可以根据目的基因的有关信息，例如，根据基因的核苷酸序列、基因的功能、基因在染色体上的位置、基因的转录产物mRNA，以及基因的翻译产物蛋白质等特性来获取目的基因。思考感悟

(2)利用PCR技术扩增目的基因含义一项在生物体外___________________的核酸合成技术原理DNA_________前提条件有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成______扩增过程目的基因DNA受热→变性解旋为_____→引物与单链相应互补序列结合→在_____________作用下延伸→形成新的DNA分子→循环重复以指数形式扩增结果以指数形式扩增：2n复制特定DNA片段双链复制引物单链DNA聚合酶

人工合成法：如果基因较小，核苷酸序列又已知，可以通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成。

目的基因01首端02终止子03目的基因RNA聚合酶04

功能：(1)使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代。使目的基因______表达和发挥作用。01能够02

思考感悟如何把导入了目的基因的受体细胞筛选出来？【提示】以四环素抗性基因为例，程序如下：

四、将目的基因导入受体细胞1．转化：__________进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和_____的过程。2．导入植物细胞(1)方法：_______________、基因枪法、花粉管通道法。(2)农杆菌特点①易感染双子叶植物和祼子植物。②Ti质粒上的_________可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体DNA上。目的基因表达农杆菌转化法T－DNA

显微单细胞Ca2＋方法：______注射技术。常用受体细胞：受精卵。原核生物特点：繁殖快、多为________、遗传物质相对较少等。对受体细胞的常用处理方法：用______处理细胞，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态(这种细胞称为感受态细胞)。3．导入动物细胞4．导入微生物细胞

思考感悟从细胞器的功能上分析，若通过基因工程生产人的糖蛋白，可以用大肠杆菌吗？【提示】不可以，糖蛋白上的糖链是在内质网和高尔基体上加工完成的，而内质网和高尔基体存在于真核细胞中，大肠杆菌是原核生物，细胞中不含有这两种细胞器。0102

五、目的基因的检测与鉴定1．检测及方法(1)检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因，采用DNA分子杂交技术。(2)检测目的基因是否_____________，采用分子杂交技术。(3)检测目的基因是否_____________，采用抗原——抗体杂交。2．鉴定：除了__________外，还需要进行个体生物学水平的鉴定，如抗虫、抗病鉴定等。转录出mRNA翻译成蛋白质分子检测

核心要点突破目的基因的获取1．两种基因文库的主要区别如下表文库类型cDNA文库基因组文库文库大小小大基因中启动子无有基因中内含子无有基因多少部分基因全部基因物种间的基因交流可以部分基因可以别提醒①细胞中成熟的mRNA是需要在转录后将非编码区转录出的序列切除的，只留下编码区序列，因而从这样的mRNA反转录来的cDNA不会有启动子序列。对于真核生物在转录后的加工过程中还要将内含子部分转录出的序列也切除掉，所以真核生物的cDNA中也不会有内含子序列。cDNA是反转录获得的双链DNA。生物之间进行基因交流，只有使用受体生物自身基因的启动子比较有利于基因的表达。通过cDNA文库获得的目的基因没有启动子，只将编码序列导入受体生物中无法转录。

2．DNA复制、PCR技术和基因克隆的比较DNA复制PCR技术基因克隆场所细胞核生物体外细胞内酶解旋酶、DNA聚合酶Taq酶限制酶、D