T_TPPA 0002-2022 RBL-2H3肥大细胞RTCA法评价中药注射剂类过敏反应操作规程.docxVIP

ICS11.120.01CCSC27

团体标准

T/TPPA0002-2022

RBL-2H3肥大细胞RTCA法

评价中药注射剂类过敏反应操作规程

Operatingprocedureforevaluatingtheanaphylactoidreactionsof

traditionalChinesemedicineinjectionbyRBL-2H3mastcell

degranulationbasedonRTCA

2022-12-22发布2022-12-22实施

天津市医药行业协会发布

T/TPPA0002-2022

目次

前言 I

1范围 1

2规范性引用文件 1

3术语和定义 1

4检测原理 1

5材料与设备 2

5.1材料 2

5.2设备 2

6实验方法 2

6.1溶液配制 2

6.2实验步骤 2

7数据处理及判定 3

T/TPPA0002-2022

I

前言

本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。

本文件由天津天士力之骄药业有限公司提出。

本文件由天津市医药行业协会归口。

本文件起草单位：天津天士力之骄药业有限公司、天津中医药大学、天津市药品检验研究院、天津市中药注射剂安全性评价企业重点实验室、创新中药关键技术国家重点实验室、现代中医药海河实验室、河南天地药业股份有限公司、天津红日药业股份有限公司。

本文件主要起草人：鞠爱春、张艳军、庄朋伟、华晓东、李德坤、岳洪水、张俊华、周水平、周立华、万梅绪、王冲、徐琳、张燕欣、李智、何毅、白晓丽、马晓慧、王蕴华、黄芝娟、江昕、张松梅。

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RBL-2H3肥大细胞RTCA法评价中药注射剂类过敏反应操作规程

1范围

本文件规定了RBL-2H3肥大细胞RTCA法评价中药注射剂类过敏反应的实验方法。

本文件适用于中药注射剂通过BL-2H3肥大细胞RTCA法对类过敏反应的评价。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB19489实验室生物安全通用要求

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

实时细胞分析real-timecellanalysis

实时细胞分析即RTCA，是基于电子阻抗技术，以细胞指数的形式实时反映细胞形态及结构变化，用以监测细胞活性的检测方法。

3.2

细胞指数cellindex

细胞指数是基于电子阻抗技术，以电阻值曲线的变化趋势反映细胞活性的评价指标。

4检测原理

RBL-2H3细胞常被用于检测过敏或类过敏反应。当细胞与相应的抗原结合后，细胞处于致敏态，引起细胞膜的稳定性下降，通透性增强，分泌性颗粒由胞内分泌到胞外，即为脱颗粒，随之释放生物活性介质如组胺、β-氨基己糖苷酶以及相应细胞因子，介导过敏或类过敏反应的发生。因而无论是I型过敏或类过敏反应都可通过检测RBL-2H3细胞脱颗粒后释放的炎症介质或其信号分子来检测过敏程度，用于评价药物是否有致敏性，进一步评价药物的致敏类型及致敏程度。

RTCA系统包括由16孔电极板、电极槽及分析系统组成的实时、连续、定量跟踪细胞增殖分化改变

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2

的细胞阻抗传感监测系统。电极板依据电阻显示实验结果，细胞接种于电极板，通过检测实时传感器表面的电阻抗信号，测量的电阻来持续监控细胞。可对细胞进行实时监测，能反映细胞增殖、存活、形态变化等细胞生物学状态。可实时定量地来测量加药后RBL-2H3细胞状态，包括细胞数量、粘附、活力和形态的改变，并提供精确的定量信息，全程实时连续动态监控。细胞的动态变化作用于电极板引起电阻值连续的变化，实验结果根据实时测得的电阻值换算为细胞指数作为指标，通过细胞指数曲线上升及下降等变化趋势表示电极板中细胞的变化。

肥大细胞激活不仅导致明显的细胞形态改变，而且会引起细胞黏附能力增加，这两者在RTCA系统中都会引起细胞指数的上升，从而反映类过敏反应的发生。

5材料与设备

5.1材料

5.1.1细胞

RBL-2H3细胞。

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