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绿假单胞菌、不动杆菌属检测:纸片法药敏试验第62页,共91页,星期日,2025年,2月5日肺结核病的病原学(一)结核菌放线菌目分支杆菌科分支杆菌属人型结核病菌牛型结核杆菌需氧不易染色(抗酸染色阳性)对外界抵抗力强菌壁含有:脂肪酸与脂质……结核结节蛋白质……过敏反应多糖类……免疫反应(凝集反应)第63页,共91页,星期日,2025年,2月5日3、结核分支杆菌实验室检查:痰菌检查具特异性,是确诊肺结核的主要依据方法:涂片抗酸染色镜检:简便快速,注意区分非典型分支杆菌标本可为晨痰、或纤支镜检查采取结核菌培养:精确可靠,特异性高。但需时4~8周。PCR-TB-DNA检查:快速、简便。二天即可。有较高假阳性或假阴性。第64页,共91页,星期日,2025年,2月5日结核菌素试验——诊断结核的参考指标包括:旧结素(OT)试验:已淘汰。结素的纯蛋白衍生物(PPD)试验:方法:0.1ml(5IU)左前臂屈侧皮内注射,48-72h测量皮肤硬结直径,结果评价如下:5~9mm(+);10~19mm(++);20mm或出现水泡与坏死者(+++~++++)-强阳性反应。临床意义:强阳性表示有活动性结核病,婴幼儿的意义更大。第65页,共91页,星期日,2025年,2月5日结核试验阴性除表示没有结核菌感染外,
应考虑以下因素的影响:结核菌感染后不到4~8周时间者;应用糖皮质激素等免疫抑制药物者;严重结核病者;淋巴细胞免疫缺陷(如:白血病、淋巴瘤、结节病、艾滋病等)者;年老体衰者。第66页,共91页,星期日,2025年,2月5日对尿液进行内毒素测定可成功地检出革兰氏阴性细菌菌尿症,也可检出厌氧性性阴性杆菌菌尿症且方法简便、快速,结果误差小第30页,共91页,星期日,2025年,2月5日血液标本真菌抗体测定第31页,共91页,星期日,2025年,2月5日深部真菌的治疗,对很多临床医生而言,都是一个很大的挑战。过度治疗和过晚治疗的情况经常难以避免地出现。这是因为,深部真菌感染病原学真菌流行病学特点决定了对该病的及早正确诊断和适宜治疗策略的实施仍然是改观其预后的关键,然而,由于许多客观存在的技术因素,深部真菌感染的早期诊断通常比较困难。在这样的背景下,深部真菌感染实验室诊断的作用就显得更为重要了第32页,共91页,星期日,2025年,2月5日真菌的实验室诊断目前一般以常规方法为主,如直接镜检、培养、组织病理检查等。这些常规方法存在不少局限性,如:
由于真菌在外环境和体内广泛存在,痰镜检和培养阳性结果可能是污染所致,不能确定为真菌感染。
北京协和医院的一个研究小组采用国外的诊断标准,对既往病历进行了重新分析,结果显示,肺部真菌感染以曲霉菌占第1位,其次为隐球菌和毛霉菌,念珠菌肺炎少见。这与国内以念珠菌肺炎为主的报道不同。
该研究小组认为,国内以痰或支气管灌洗液真菌培养(多为念珠菌)作为肺部真菌感染的诊断依据的作法值得商榷,因为念珠菌是人类口腔的正常定植菌,痰培养难免出现假阳性。
这提示我们,住院患者痰中培养出念珠菌属并不足以确定“念珠菌肺炎”的诊断,这往往导致过度治疗,同时,更需要加强对曲霉菌感染的分析和判断,由于没能及时判断往往导致过晚治疗;
第33页,共91页,星期日,2025年,2月5日血培养历时太长,且阳性率较低,Reiss等报告临床血培养最高也仅10%。中国侵袭性肺部真菌感染工作组制订的《侵袭性肺部真菌感染的诊断标准与治疗原则(草案)》明确指出,血液标本真菌抗体测定作为疾病动态监测指标有临床意义,但不能用于早期诊断;
作为金标准的组织病理学诊断需要侵入性操作,对于低血小板患者和临床状态很差的患者都是不适用的,更何况组织病理学不能有效鉴定真菌种属。
第34页,共91页,星期日,2025年,2月5日真菌感染机体的过程中,其菌体成分作为抗原释放于体液中并刺激机体产生特异性抗体,因此对抗原和抗体的检测有助于诊断。由于患者本身存在严重免疫抑制,无法产生足够浓度的抗体,且抗体的产生需要一定的时间,往往在起病2周后才显著升高,使得抗体检测对于早期诊断的意义不大。而真菌抗原检测则具有较高的诊断价值。第35页,共91页,星期日,2025年,2月5日系统性真菌感染时,真菌可在宿主血、尿及其他体液中持续释放其抗原
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