分子生物学-复制.pptxVIP

基因信息的传递地球生命的传奇

生命简史TheBigBang150－200亿年MilkyWaygalaxy136亿年solarsystem46亿年

TheLifeStory40亿年古细菌、真细菌、真核原生生物

TheLifeStory40亿年寒武纪生命大爆炸5－6亿年多细胞生物01植物登陆 4亿年 02动物登陆 3.6亿年03哺乳动物诞生 2.3亿年04灵长类动物诞生 5500万－8000万年05人类直系祖先诞生700万－500万06现代人诞生 5－10万年07人类文明史1万年08

科学家复原的“杜马伊”形象

学科简史1859年CharlesRobertDarwin

1865年Mendel’sPea1941年OneGene,OneEnzyme1953年DNAdoublehelix1966年GeneticCodeCracked1972年FirstrecombinantDNA1982年Firsttransgenicmice2003年人类基因组测序基本完成

现代分子生物学的建立和发展阶段遗传信息传递——中心法则的建立准备和酝酿阶段蛋白质是生命的主要基础物质生物遗传的物质基础是DNA分子生物学发展阶段

01重组DNA技术的建立和发展02基因组研究的发展03单克隆抗体及基因工程抗体的建立和发展04基因表达调控机理05细胞信号转导机理研究成为新的前沿领域初步认识生命本质及改造生命的深入发展阶段分子生物学发展阶段

第十章DNA的生物合成

BiosynthesisofDNA复制过程起始、延伸、终止损伤修复光、切除、重组、SOS修复复制条件其它蛋白酶聚合酶引物酶—引发体连接酶复制特点半保留复制半不连续合成——冈崎片断

中心法则

thecentraldogma遗传信息亲代——子代；复制DNA基本的三类RNA制造蛋白质，决定生物的表现型转录和翻译——基因表达

RNA病毒复制RNA遗传信息亲代——子代逆转录RNA——DNA中心法则的补充

DNAdependentDNApolymerase——DDDP1DNAdependentRNApolymerase——DDRP2RNAdependentRNApolymerase——RDRP3RNAdependentDNApolymerase——RDDP4

第一节复制基本规律

——复制的特点半保留复制semiconservativereplication亲代DNA链为模板，合成子代DNA链子代DNA双链中含一条亲代DNA链

DNA复制机制的三种假说

使子代DNA与亲代DNA不同

1958年M.Messelson和F.Stahl0115N培养基→14N培养基02提取DNA，作密度梯度离心03复制基本方式的证明

从原则上保证了遗传的相对保守性01奠定了DNA是遗传物质的地位02阐明半保留复制的意义

复制起始点originDNA复制从特定的位点起始（复制子）富含AT原核生物一个真核生物多个

三、双向复制

bidirectionalreplication微生物中，也可进行单向复制如滚环复制复制起始点为中心，向两个方向同时进行复制

需要引物primerDNAPolymerase不能从头开始只能延伸已有核酸链引物酶Primase合成一小段RNA链(引物)提供3’端自由羟基（3’-OH）引物的大小原核生物:50～100个核苷酸真核生物：约为10个核苷酸

DNA聚合酶合成方向5‘——3’01DNA双链逆向平行02DNA的解链和复制同时进行03半不连续复制

5′端3′端CGA

01ATAT02TTTTTATAT03ATATTTTTT5‘——3’

连续领头链(leadingstrand)不连续冈崎片断(Okazakifragment)原核生物1K～2K真核生物100随从链(laggingstrand)

第二节酶学和拓扑学变化

DNA复制的条件物模板解旋解链DNA聚合酶DNA连接酶

底物substrate模板templatedATP，dGTP，dCTP，dTTP?DNA复制是模板依赖性的(dNMP)n+1+PPi(dNMP)n+dNTPDNA

解链及拓扑学变化

01解链酶或rep蛋白02解开DNA双链032ATP/bpbasepair解螺旋酶（unwind