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核酸提取考试题库及答案
单项选择题(每题2分,共10题)
1.核酸提取中常用的蛋白酶是()
A.蛋白酶KB.胃蛋白酶C.胰蛋白酶D.木瓜蛋白酶
2.核酸提取过程中,用于沉淀核酸的常用试剂是()
A.乙醇B.丙酮C.氯仿D.异戊醇
3.提取RNA时,为防止RNase污染,实验器材需经过()处理。
A.高压灭菌B.紫外线照射C.DEPC水浸泡D.酒精擦拭
4.下列哪种样本不适合用于核酸提取()
A.血液B.组织C.尿液D.空气
5.核酸提取时,离心的主要目的是()
A.使核酸变性B.分离不同成分C.加速反应D.去除杂质
6.提取基因组DNA时,常使用的缓冲液是()
A.TE缓冲液B.PBS缓冲液C.Tris-HCl缓冲液D.SDS缓冲液
7.核酸在260nm波长处有特征吸收峰,是因为其含有()
A.磷酸基团B.核糖C.碱基D.脱氧核糖
8.核酸提取过程中,酚-氯仿-异戊醇的作用是()
A.沉淀核酸B.溶解核酸C.去除蛋白质D.抑制核酸酶
9.提取线粒体DNA时,首先要进行()
A.细胞破碎B.离心分离C.核酸沉淀D.去除杂质
10.核酸提取后,检测其浓度和纯度常用的仪器是()
A.电子天平B.酸度计C.分光光度计D.离心机
多项选择题(每题2分,共10题)
1.核酸提取的基本步骤包括()
A.样本处理B.核酸分离C.核酸纯化D.核酸检测
2.影响核酸提取质量的因素有()
A.样本类型B.提取方法C.实验环境D.操作人员
3.核酸提取中常用的细胞破碎方法有()
A.机械破碎B.酶解破碎C.化学破碎D.超声破碎
4.用于核酸纯化的方法有()
A.柱层析法B.密度梯度离心法C.凝胶过滤法D.离子交换法
5.提取RNA时,需要注意的事项有()
A.防止RNase污染B.低温操作C.选择合适的样本D.快速提取
6.核酸提取中常用的缓冲液成分有()
A.TrisB.EDTAC.NaClD.SDS
7.从血液中提取核酸的方法有()
A.盐析法B.离心法C.试剂盒法D.酚-氯仿法
8.核酸提取后,检测其完整性的方法有()
A.琼脂糖凝胶电泳B.聚丙烯酰胺凝胶电泳C.毛细管电泳D.高效液相色谱
9.提取病毒核酸的特点包括()
A.样本量少B.病毒种类多C.核酸含量低D.易污染
10.核酸提取在哪些领域有应用()
A.医学诊断B.基因工程C.食品检测D.环境监测
判断题(每题2分,共10题)
1.核酸提取过程中,温度越高越好。()
2.提取核酸时,样本量越大,提取效果越好。()
3.氯仿可用于去除核酸提取液中的蛋白质。()
4.提取RNA时,DEPC处理过的器材可重复使用。()
5.核酸在280nm波长处的吸收峰可用于检测其浓度。()
6.用乙醇沉淀核酸时,温度越低沉淀效果越好。()
7.不同来源的核酸提取方法完全相同。()
8.核酸提取后可直接用于后续实验,无需检测。()
9.蛋白酶K可在高温下保持活性。()
10.提取线粒体DNA时不需要破碎细胞。()
简答题(每题5分,共4题)
1.简述核酸提取的总体原则。
答案:保持核酸完整性,尽量去除杂质,包括蛋白质、多糖、脂类等,同时防止核酸降解,确保提取的核酸质量满足后续实验需求。
2.核酸提取中,去除蛋白质的常用方法有哪些?
答案:常用酚-氯仿-异戊醇抽提法,使蛋白质变性分层除去;还有蛋白酶K消化法,酶解蛋白质;盐析法,改变盐浓度使蛋白质沉淀等。
3.为什么提取RNA时要特别注意防止RNase污染?
答案:RNase广泛存在且活性稳定,极易降解RNA。一旦RNA被RNase降解,就无法满足后续实验如RT-PCR等需求,影响实验结果。
4.核酸提取后检测浓度和纯度有什么意义?
答案:检测浓度可确定核酸含量是否满足后续实验要求;检测纯度能判断核酸中蛋白质、盐等杂质残留情况,纯度不佳可能影响酶切、扩增等后续实验。
讨论题(每题5分,共4题)
1.比较不同核酸提取方法的优缺
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