葡萄酒中黄烷醇类物质含量的测定 高效液相色谱法 征求意见稿.pdf

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ICS01.040.65

CCSB04

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团体标准

T/NAIA×××-××××

葡萄酒中黄烷醇类物质含量的测定

高效液相色谱法

××××-××-××发布××××-××-××实施

宁夏化学分析测试协会发布

葡萄酒中黄烷醇类物质含量的测定高效液相色谱法

1范围

本文件规定了葡萄酒中黄烷醇类物质含量的高效液相色谱测定方法。

本文件适用于葡萄酒中黄烷醇类物质：表没食子儿茶素、儿茶酸、表没食子儿茶素没食子酸酯、

表儿茶酸、表儿茶酸没食子酸酯、杨梅素、异鼠李素含量的测定。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用

文件，仅该日期对应的版本适用本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）

适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4原理

试料中的黄烷醇类物质用75%甲醇水溶液提取，涡旋超声，微孔滤膜过滤，高效液相色谱法测

定，外标法定量。

5试剂与材料

除非另有说明，本方法所用试剂均为优级纯，水为GB/T6682规定的一级水。

5.1甲醇（CH3OH）：色谱纯，

5.2乙酸（CH3COOH）：优级纯

5.3表没食子儿茶素（（-）-Epigallocatechin，CAS号970-74-1）、儿茶酸（catechin，CAS号

7295-85-4）、表没食子儿茶素没食子酸酯（（-）-Epigallocatechingallate，CAS号989-51-5）、

表儿茶酸（Epicatechin，CAS号490-46-0）、表儿茶酸没食子酸酯（（-）-Epicatechingallate，

CAS号1257-08-5）、杨梅素（Myricetin，CAS号529-44-2）、异鼠李素（Isorhamnetin，CAS号

480-19-3）

5.480%甲醇水溶液：量取80ml甲醇，用水定容至100mL。

5.575%甲醇水溶液：量取75ml甲醇，用水定容至100mL。

5.6黄烷醇类物质单标储备溶液

分别准确称表没食子儿茶素（（-）-Epigallocatechin）、儿茶酸（catechin）、表没食子儿

茶素没食子酸酯（（-）-Epigallocatechingallate）、表儿茶酸（Epicatechin）、表儿茶酸没

食子酸酯（（-）-Epicatechingallate）、杨梅素（Myricetin）、异鼠李素（Isorhamnetin）20

mg，用80%甲醇水溶液（5.4）溶解并分别定容至10mL容量瓶中，即为2mg/ml的单标储备液，

于零下20摄氏度下，贮存于密闭的棕色玻璃瓶中，保存有效期为6个月。水为GB/T6682规定的

一级水。

5.7黄烷醇类物质混合标准工作液

在使用中用80%甲醇水溶液（5.4）作为溶剂，将单体酚标准储备液进行稀释混合后成为0.2

mg/ml混合标准使用液，在零下20℃条件下，有效期为6个月。水为GB/T6682规定的一级水。

6仪器与设备

6.1高效液相色谱仪（配紫外检测器）。

6.2旋转蒸发仪。

6.3涡旋仪。

6.4离心机。

6.5超纯水机。

6.60.45μm滤膜，有机相。

7试样的提取

准确吸取5.0ml葡萄酒样品于50ml试管中，加入20ml75%甲醇水溶液（5.5），旋涡振荡1min

后在室温下超声30min，经滤膜（6.5）过滤，上机待测。

8测定

色谱柱：Agilent-ZORBAXSB-C18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm）或性能相当者。

流动相：A为2%乙酸水；B为乙腈:水（1:1）-0.5%