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第54讲基因工程的基本工具和基本操作程序
课标内容1()阐明DNA重组技术的实现需要利用限制性内核酸酶、DNA连接酶和载体三
种基本工具。2()阐明基因工程的基本操作程序主要包括目的基因的筛选与获取、基因表达载
体的构建、将目的基因导入受体细胞和目的基因的检测与鉴定等步骤。3()DNA的粗提取与鉴
定实验。4()利用聚合酶链式反应P(CR)扩增DNA片段并完成电泳鉴定,或运用软件进行虚拟
PCR实验。
考点一重组DNA技术的基本工具
基础•精细梳理夯实必备知识
1.基因工程概述
DNA分子与杂交•育种相比
水平/基因重组
创造出更符[基因工程J按照人们的愿望.通
合人们需要1।
过转基因等技术,赋
的新的生物一J(国1也即
、予生物新的遗传特性
类型和生物与涉变育
产品种相比克服..汆变丕亲邳
中疏)-的障捕赢蔽解法
生物体外—操作
、—啕遗痴毓
环境
名师解读
基因工程的理论基础
基理[①DNA的基本组成单位都是四种脱氧核昔酸
因论②DNA分子都遵循碱基互补配对原则
拼
接础;旋结构
2.重组DNA技术的基本工具
⑴限制性内核酸酶也(称“限制酶”)
S()-主要存在于原核生物中
去枇识别双链DNA分子的特定脱氧核甘酸
一序列,并使每一条链中特定部位的磷酸
,二酯键断开
-产生黏性末端或平末端
名师解读
①将一个基因从DNA分子上割下来需要两处,同时产生四个黏性末端或平末端。
②限制酶不割自身DNA的原因是原核生物DNA分子中不存在该酶的识别序列或识别序列
已经被修饰。
2()DNA连接酶
种[类]T4DNA连接酶
E.coliDNA连接酶
大肠杆菌来[源)T4噬菌体
悬Q黏性末端和平末端都可
只“缝合”黏性末端1持“缝合,,r
£挨效率较低?
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