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ICS07.100
CCSC10
CAV
团体标准
T/CAV022—2025
人副流感病毒核酸检测技术指南
TechnicalGuidelinesforHumanParainfluenzaVirusNucleicAcidDetection
2025-04-23发布2025-04-23实施
中国疫苗行业协会发布
T/CAV022—2025
人副流感病毒核酸检测技术指南
1范围
本文件规定了人副流感病毒核酸检测的操作方法和生物安全等内容。
本文件适用于人呼吸道标本中人副流感病毒的核酸检测。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,
仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本
文件。
GB19489实验室生物安全通用要求
WS233病原微生物实验室生物安全通用准则
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
人副流感病毒Humanparainfluenzavirus,HPIV
主要引起人类呼吸道感染的单股负链有膜RNA病毒。
人副流感病毒血清型SerotypeofHPIV
依据血清学特征和基因组差异,HPIV可以分为HPIV1、HPIV2、HPIV3和HPIV4四种血清型,其中
HPIV1和HPIV3属于呼吸道病毒属,HPIV2和HPIV4属于腮腺炎病毒属。
4缩略语
下列缩略语适用于本文件。
Ct值:荧光信号超过背景阈值所经历的循环数(cyclethresholdvalue)
Real-timeRT-PCR:实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(real-timefluorescencequantitativereverse-
transcriptionpolymerasechainreaction)
RNA:核糖核酸(ribonucleicacid)
RNase:核糖核酸酶(ribonuclease)
RNaseP:核糖核酸酶P(ribonucleaseP)
5病毒核酸检测
标本处理和保存
5.1.1呼吸道标本(含鼻拭子、咽拭子、鼻咽拭子、支气管肺泡灌洗液、鼻咽吸取物及气管吸取物等)
采集后无需预处理,可直接进行病毒RNA提取。
5.1.2痰液标本需经蛋白酶K消化或痰液消化液预处理(见附录A)后进行病毒RNA提取。
5.1.3标本采集后24h内检测,需于2℃~8℃保存;若无法在24h内完成检测,应于-60℃~-80℃
超低温环境保存。
核酸提取
病毒RNA提取应严格遵循试剂盒或全自动核酸提取仪操作说明执行,若计划在24h内使用,需于
2℃~8℃保存;如需长期保存,应于-60℃~-80℃超低温环境保存,避免反复冻融。
1
T/CAV022—2025
引物和探针
合成四种血清型HPIV的特异性引物和探针,探针分别标记不同的荧光报告基团,用于不同血清型
HPIV的核酸检测(见附录B.1)。
反应体系
配制HPIV四种血清型单通道核酸检测Real-timeRT-PCR反应体系,包含预混反应缓
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