第十一章皂苷91课件.ppt

2、氯仿-浓硫酸反应试样溶于氯仿中加入浓硫酸后，氯仿层显红色或蓝色，硫酸层有绿色荧光出现。3、三氯醋酸反应样品溶液点于滤纸上，喷25%三氯醋酸乙醇溶液，甾体皂苷在加热60℃时即可显示红色→紫色斑点，而三萜皂苷需加热至100℃，才显色。4、五氯化锑（kahlenberg）反应将样品醇溶液点于滤纸上，喷以20%三氯化锑（或五氯化锑）氯仿溶液（不应含乙醇和水）干燥后显蓝紫色。注意：五氯化锑腐蚀性很强，宜少量配置，用后倒掉。5、冰醋酸-乙酰氯反应：

样品溶于冰醋酸，加乙酰氯数滴及氯化锌结晶数粒，稍加热，则呈现淡红色或紫色。★第三节提取与分离一、提取方法1、皂苷的提取：药材醇（甲醇或乙醇）提醇提液回收溶剂后，加适量水，亲脂性溶剂（石油醚、苯）萃取亲脂性杂质水层正丁醇萃取正丁醇层回收溶剂粗制总皂苷油脂，色素等杂质1.1正丁醇提取法1.2溶剂沉淀法利用皂苷在甲醇、乙醇中溶解度大，在丙酮、乙醚中溶解度小的性质，用乙醇提取后，在醇液中加入丙酮，使皂苷析出沉淀。药材（可先脱脂）乙醇提取提取液适量浓缩后加入丙酮滤液沉淀（粗总皂苷）2.皂苷元的提取方法1：皂苷元精品原料水，36℃保温24-48小时预发酵药渣3%硫酸加热水解3-6小时，过滤，水洗，干燥药渣酸水解石油醚、汽油或甲苯连续回流4-6小时石油醚提取液适量回收，放置析晶，抽滤回收皂苷元粗品乙醇或丙酮处理，活性炭脱色重结晶提取方法2.原料按上述提取皂苷工艺进行皂苷提取常规酸水解水解水解液苯、氯仿等有机溶剂萃取萃取液（苯、氯仿）回收皂苷元药材乙醚浸提乙醚液回收乙醚乙醚浸膏1％KOH溶液不溶物碱溶物（酸性物质）浓缩，加HCl沉淀，过滤沉淀物（酸性皂苷元）方法3.

碱提酸沉淀法。利用某些皂苷元含有羧基。可用碱水提取。二、皂苷的分离、精制(一)沉淀法1.分段沉淀法原理：利用皂苷难溶乙醚、丙酮等溶剂的性质。操作：将粗皂苷先溶于少量甲醇或乙醇，然后逐滴加入乙醚、丙酮或乙醚-丙酮（1∶1）的混合溶液，摇匀，皂苷即析出，过滤得到；滤液再加入乙醚等溶液，放置，又可析出不同的皂苷。特点：这种方法简单，但得到的皂苷含杂质较多，分离不完全，需反复处理。原理：利用甾体皂苷能与胆甾醇生成难溶性的分子复合物，与其它水溶性成分分离。2.胆甾醇沉淀法粗总皂苷（溶于少量乙醇）加胆甾醇饱和乙醇溶液，稍加热，过滤（水溶性杂质）沉淀顺次用水、醇、乙醚洗涤。干燥干燥的沉淀乙醚回流乙醚液残留物（胆甾醇）（甾体皂苷）滤液操作：（二）色谱法1.分配色谱法2.吸附色谱法3.高效液相色谱法4.大孔吸附树脂法1.分配色谱法利用被分离成分在固定相和流动相之间的分配系数的不同而达到分离的方法。按照固定相与流动相的极性差别，分配色谱法有正相与反相色谱法之分离。★分配色谱法分配色谱法基本原理正相分配色谱反相分配色谱正相色谱极性物质吸附强非极性物质吸附弱后出先出反相色谱极性物质吸附弱非极性物质吸附强先出后出1.分配色谱法对于皂苷的分离采用反相分配色谱法效果好。固定相：用水饱和的硅胶；流动相：三氯甲烷-甲醇-水组成的极性大的溶剂系统。2.吸附色谱法吸附剂：硅胶流动相：混合溶剂皂苷（亲水性强）：反相硅胶色谱（极性大的先出）皂苷元（亲脂性强）：正相硅胶色谱（极性小的先出）3.高效液相色谱法1.贮液瓶2.高压输液泵3.进样器4.色谱柱5.检测器6.记录装置对于皂苷常采用反相色谱柱，用甲醇-水或乙腈-水等溶剂为洗脱剂。★4.大孔吸附树脂大孔树脂吸附技术是上世纪七十年代发展起来的一种新工艺，简单讲,就是将中药复方煎煮液通过大孔树脂,吸附其中的有效成分,再经洗脱回收，除掉杂质的一种纯化精制方法。其操作的基本程序大多是：中药提取液－通过大孔树脂－吸附上有效成分的树脂－洗脱－洗脱液－回收溶液－药液－干燥－半成品。该方法广泛应用于中药研发中的分离和提取过程中（3）吸附原理：①吸附性：大孔吸附树脂本身具有吸附性，是由范德华力或氢键吸附的