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ICS65.020

B16

DB62

甘肃省地方标准

DB62/T4068—2019

食用百合脱毒技术规程

2019-12-01实施2019-10-23发布

2019-12-01实施

甘肃省市场监督管理局发布

DB62/T4068—2019

目次

前言 II

1范围 1

2规范性引用文件 1

3术语与定义 1

4食用百合脱毒种苗生产流程 1

5溶液的配制和保存 1

6室内灭菌 3

7脱毒材料 3

8病毒检测 4

9脱毒组培苗扩繁 4

10炼苗移栽与管理 4

附录A(规范性附录)食用百合脱毒种苗生产流程 6

附录B(资料性附录)培养基药品名称、用量及母液配制 7

附录C(资料性附录)培养基配制 8

附录D(资料性附录)基质消毒方法 9

I

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II

DB62/T4068—2019

前言

本标准依据GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本标准由甘肃省农业农村厅提出、归口并监督实施。

本标准由甘肃省农业科学院生物技术研究所制定。

本标准主要起草人：林玉红、裴怀弟、崔文娟、石有太、陈军、李淑洁。

DB62/T4068—2019

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食用百合脱毒技术规程

1范围

本标准规定了食用百合脱毒种苗生产的术语和定义、常用溶液配制、培养基制作与处理、消毒与接种、脱毒苗生产等技术要求。

本标准适用于茎尖培养和热处理相结合方法生产食用百合脱毒种苗。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T603化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备

GB5749生活饮用水卫生标准

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

NY/T1744切花百合脱毒种球

3术语与定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

脱毒材料virus-freematerial

利用生物技术手段，对感染病毒的植物组织进行茎尖剥离、热处理、化学药剂处理等有效脱毒方法，从而获得的无病毒种苗材料。

3.2

增殖培养proliferationculture

将离体无菌芽苗周期性的分株、分割、剪截等操作后转接入新鲜增殖培养基中不断倍增的培养过程。3.3

膨大培养expansionculture

诱导百合试管苗鳞茎膨大的培养过程。

4食用百合脱毒种苗生产流程

见附录A。

5溶液的配制和保存

5.1母液的配制

5.1.1制备原则

1

2

DB62/T4068—2019

MS为基础培养基，药品配制按照GB/T603规定方法配制，实验室用水执行GB/T6682标准，母液成份参见附录B。配置好的母液贴上标签，4℃冰箱保存，贮藏时间在2~3个月之内，如有霉菌或沉淀则不得使用。

5.1.2大量元素母液配制

大量元素母液配成50倍的贮备液。不同药品单独溶解，待前一种药品完全溶解后再加入后一种化学药品，依次类推，用三级蒸馏水定容至1000mL。

5.1.3钙盐母液配制

钙盐母液配成50倍的贮备液。将称量好的药品不断搅拌使之完全溶解，用三级蒸馏水定容至1000

ml。

5.1.4微量元素母液配制

微量元素母液配成100倍的贮备液。不同药品单独溶解，待前一种药品完全溶解后再加入后一种化学药品，依次类推，用三级蒸馏水定容至1000mL。

5.1.5铁盐母液配制

铁盐母液配成100倍的贮备液。分别溶解FeSO?·7H?O和Na?-EDTA,不断搅拌使之完全溶解，再将2种溶液混合，用三级蒸馏水定容至1000mL。

5.1.6维生素母液配制

维生素母液配成200倍的贮备液。不同药品单独溶解，溶解后逐个混合，用三级蒸馏水定容至500ml。

5.1.7植物激素母液配制

(6-苄基腺嘌呤)6-BA用2M的氢氧化钠助溶，再用三级蒸馏水配制成0.5mg/L或者1mg/L的母液； (萘乙酸)NAA用95%乙醇助溶，再用三级蒸馏水配制成0.5mg/L或者1mg/L的母液。配置好的母液贴上标签，-20℃冰箱冷冻保存备用，用时提前解冻即可，贮藏时间3个月之内，如有沉淀析出则不得使用。

5.2培养基配制与处理

5.2.1培养基配制

基本培养基由化学药品、蔗糖