浙江省不同产地茶叶主要成分含量比较及分析.docxVIP

摘要：

目的：比较浙江省不同产地茶叶的主要成分含量差异。

方法：采用高效液相色谱（HPLC）法测定不同产地茶叶中表儿茶素（EC）、表儿茶素没食子酸酯（ECG）、表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）、没食子酸（GA）及咖啡因（Caf）的含量。色谱柱为AgilentSB-C18（5μm，4.6mm×250mm）；流速为1.0mL/min；进样量为20μL；检测波长为280nm；柱温为30℃；以乙腈-0.2%磷酸溶液（10:90）为流动相A、乙腈-0.2%磷酸溶液（80:20）为流动相B进行梯度洗脱。

结果：不同产地茶叶中表儿茶素（EC）、表儿茶素没食子酸酯（ECG）、表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）、没食子酸（GA）及咖啡因（Caf）的含量区间分别为0.57%～0.85%、0.13%～1.78%、0.51%～7.04%、0.15%～0.31%、1.63%～3.37%。

结论：本实验结果可以为茶叶人工培育和GAP基地建设提供依据，同时为茶叶提取物制备提供药材筛选依据。

关键词：茶叶；主要成分；高效液相色谱；差异

0?引言

茶为山茶科植物茶（Camelliasinensikuntze）的芽叶，具有抗氧化、抗衰老、抗辐射、防治心血管疾病、防癌抗癌及调节免疫等多种功效，被应用于食品、饲料、化妆品、医药等多个领域。研究表明，从茶叶中提取的茶多酚在增强人体健康方面具有重要的作用。茶多酚因其独特的药理性质备受关注，许多体内和体外研究都表明茶多酚在预防癌症，治疗慢性胃炎、神经退化和心血管疾病中具有重要作用。

我国茶园种植面积居世界首位，茶资源丰富，利用碎末茶、中低档茶与夏秋茶提取茶多酚的工艺非常成熟。本文对茶叶主产区浙江省多个产地的茶叶质量进行分析，以表儿茶素（EC）、表儿茶素没食子酸酯（ECG）、表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）、没食子酸（GA）及咖啡因（Caf）的含量为指标进行考察研究，为企业选择生产原料提供依据。

随着茶多酚应用的开发，其分析方法也不断得到提高和完善，用于测定茶多酚含量的方法有光谱法、电化学法、滴定法、色谱法等。非色谱法只能测定茶多酚总量，而色谱法具有专属性强、灵敏度高等优点，可以用于茶多酚单一成分的测定，其中常用的有高效液相色谱法、气相色谱法、质谱法等。本研究采用高效液相色谱法进行茶多酚含量的测定。

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1?材料与方法

1.1材料与试剂

茶叶样品（共收集14批不同产地的茶叶原料）：杭州市径山镇（编号1、2、3、4）、绍兴市新昌县（编号5、6、7）、金华市磐安县（编号8、9、10、11）、东阳市东白山（编号12、13、14）。

对照品：表儿茶素（EC）、表儿茶素没食子酸酯（ECG）、表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）、没食子酸（GA）及咖啡因（Caf），购于中国食品药品检定研究院。

试剂：乙腈（色谱级）；磷酸（色谱级）、甲酸（分析纯）；水（纯净水）；氢氧化钙（分析纯）。

1.2仪器与设备

Agilent1260高效液相色谱仪，VWD检测器；METTLERTOEDOME204E（万分之一）、METTLERTOEDOXS105（十万分之一）分析天平；恒温水浴锅；超声清洗机。

1.3实验方法

1.3.1色谱条件

色谱柱为AgilentSB-C18（5μm，4.6mm×250mm）加保护柱；流速：1.0mL/min；进样量：20μL；检测波长：280nm；柱温：30℃；流动相：乙腈-0.2%磷酸溶液（10:90）为流动相A，乙腈-0.2%磷酸溶液（80:20）为流动相B，按照0～10min时A为100%，10～30min时A从100%到90%，30～50min时A从90%到100%，50～60min时A为100%进行梯度洗脱。

1.3.2对照品溶液的制备

取表儿茶素（EC）对照品、表儿茶素没食子酸酯（ECG）对照品、表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对照品、咖啡因（Caf）对照品和没食子酸（GA）对照品适量，精密称定，分别加25%甲醇制成每lmL含表儿茶素68μg、表儿茶素没食子酸酯0.14mg、表没食子儿茶素没食子酸酯0.85mg、咖啡因14μg、没食子酸20μg的溶液，即得。

1.3.3供试品溶液的制备

将各批次样品粉碎成中粉，称取约2.0g，精密称定，置于1L烧杯中，加入新煮沸的纯净水400mL，在95℃热水水浴锅中保温10min，每隔30s搅拌1次；温浸结束后冷却至室温，过滤到500mL容量瓶中，并用少量纯净水洗涤烧杯和样品残渣2～3次，合并滤液；在量瓶中加入甲酸0.5mL，再加水定容至刻度，摇匀；用0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。

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2?结果与分析

2.1线性范围考察

精密称取一定量对照品，加甲醇溶解，配置成一系列梯度浓度，按“1.3.1”项