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ICS07.100.01
CCSB70 45
广 西 壮族 自 治区地 方标 准
DB45/T2482—2022
中密度纤维板霉变菌检测技术规范
Testingspecificationformildewofmediumdensityfibreboard
DB45/T2482—2022
前
本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则
起草。
言
第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本文件由广西壮族自治区林业局提出、归口并宣贯。本文件起草单位:广西壮族自治区林业科学研究院。本文件主要起草人:宋贤冲、张照远、王军锋、陈文渊、唐健、黎小波、王会利、石媛媛、郭丽梅、
邓小军、陈桂丹、黄家毅、覃祚玉、覃其云、潘波、梁杰培、陈文江。
DB45/T2482—2022
中密度纤维板霉变菌检测技术规范
1 范围
本文件规定了中密度纤维板霉变菌的术语和定义、检测方法、结果判定。本文件适用于中密度纤维板霉变过程中产生的脉孢菌属(Neurosporasp.)和木霉属(Trichoderma
sp.)真菌的定性检测。
2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T11718 中密度纤维板
NY/T2811 橡胶树棒孢霉落叶病病原菌分子检测技术规范
3 术语和定义
DB45/T2482—2022
4.3 培养基和试剂
PDA培养基(按NY/T2811的规定配制)、无菌水、75%乙醇。
4.4 取样
使用无菌手术刀切取中密度纤维板霉变部位,装入无菌聚丙烯袋中,保存在0℃~4℃的低温保存箱中带回实验室备用,如不立即处理,则应放置于4℃环境中保存。
4.5 分离
4.5.1 稀释
将4.4中的样品(如样品过大则应切取约2cm×2cm大小的样品)加入盛100mL无菌水的500mL三角瓶中,振荡10min,使样品均匀地分散在稀释液中成为样品悬液;吸取1mL样品悬液到9mL无菌水中,按10倍法依次稀释,通常稀释到10-3。在每次吸取样品悬液时,所用的吸管在稀释液中反复吸入吹出悬液3~5次,使管壁吸附部分饱和以减少因管壁吸附而造成的误差,并使悬液进一步分散。
4.5.2 涂布
先于已灭菌培养皿中加入15mL的PDA培养基,凝固后,用1mL无菌吸管吸取一定稀释度的样品悬液,加0.05mL于培养基表面,然后立即用玻璃刮刀将悬液均匀地涂抹于培养基表面。用同一支吸管接种同一样品不同稀释度的悬液时,应从高稀释度开始,然后依次接种较低稀释度的悬液。
DB45/T2482—2022
4.8 菌落观察
取出培养皿,用肉眼或放大镜观察菌落的生长或发育速度、菌落的颜色、菌落表面质地、菌落边缘、培养基颜色变化等,并记录在附录B中。
4.9 显微观察
取一片洁净的载玻片,在中央滴一滴无菌水。用接种针或解剖针从培养皿的纯化菌落上挑取少许含有子实体的菌体,放入载玻片的液滴中,并将菌丝体挑开。用镊子取盖玻片,从一边轻轻加盖,避免产生气泡,如果有气泡,可在酒精灯上短时加热除去。用显微镜观测载玻片标本中菌丝、子实体、孢子等的特征,并记录在附录B中。
5 结果判定
将4.8和4.9的观察结果与附录A和附录C进行对照,确定菌属。
DB45/T2482—2022
附录A(资料性)
脉孢菌属和木霉属的主要形态特征
A.1 脉孢菌属Neurosporasp.
子囊菌亚门、子囊菌纲、粪壳霉目、粪壳霉科的一属。菌落生长迅速,菌丝蔓延生长、无色、有横隔、多核,生孢子的气生菌丝无规律地向空中生长,呈双叉式分枝。分生孢子球形或近似球形、成链、单细胞。子囊壳簇生或散生,光滑或具有松散菌丝,呈无毛或有毛状,壁亚革质或炭质,褐色或褐黑色。顶部突起处生孔口乳头状或短嘴状。子囊壳内最初充满具分隔的侧丝,当形成子囊时侧丝消失,继后子囊发育充满子囊壳。子囊圆筒形,含4~8个孢子。子囊孢子椭圆形,初期无色,成熟时变为黑色或墨绿色,单细胞,带有纵的纹饰故称脉孢霉。菌落最初白色、粉粒状,很快变为淡黄色、绒毛状,成熟时上层覆盖成团块的分生孢子。主要根据子囊壳、子囊和子囊孢子的大小进行分类。
A.2 木霉属Trichodermasp.
半知菌亚门、丝孢纲、丝孢目、从梗孢科的一属。菌落生长迅速,棉絮状或致密如毡,产孢丛束区常排列成同心轮纹,表面为不同程度绿色,反面无色或有色,气味有或无。主要特征为菌丝有隔,分枝繁复。分生孢子梗为菌丝的短侧枝,其上对生或互生分枝,
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