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纳豆激酶的生产工艺流程

目录

CATALOGUE

01

原料预处理阶段

02

菌种培养流程

03

发酵工艺控制

04

酶解提取工艺

05

精制纯化流程

06

质量验证体系

PART

01

原料预处理阶段

大豆筛选与分级标准

01

筛选标准

选用非转基因、无病虫害、完整饱满的大豆作为原料。

02

分级要求

根据大豆的颗粒大小、蛋白质含量、脂肪含量等指标进行分级。

清洗与浸泡参数控制

清洗方法

采用流动水清洗,去除大豆表面的尘土和杂质。

01

浸泡条件

浸泡时间、温度、水质等参数需严格控制,以确保大豆吸水膨胀,便于后续处理。

02

需达到一定温度,以杀灭大豆中的杂菌和有害微生物。

灭菌温度

高温蒸汽灭菌操作

根据大豆的量和蒸汽的温度、压力等因素确定,确保灭菌彻底。

灭菌时间

PART

02

菌种培养流程

枯草芽孢杆菌活化步骤

活化温度与时间

选择合适的活化剂,提高枯草芽孢杆菌的活化率。

活化次数

活化剂选择

在适宜的温度下,进行一定时间的活化处理,使菌体恢复活性。

通过多次活化,提高菌种的活性及数量。

种子液扩大培养条件

营养成分

提供充足的碳源、氮源、无机盐等营养成分,满足菌体生长需求。

01

培养温度

选择最适培养温度,使菌体快速繁殖。

02

pH值

调节培养液的pH值,创造适宜的菌体生长环境。

03

溶氧量

保证培养液中的溶氧量,满足菌体生长需求。

04

菌种纯度检测方法

显微镜检测

通过显微镜观察菌体形态,初步判断菌种纯度。

01

菌落特征检测

在固体培养基上划线培养,观察菌落的形态、颜色等特征。

02

生化试验

进行一系列生化试验,进一步验证菌种的纯度及种类。

03

分子生物学检测

利用PCR、测序等分子生物学技术,对菌种进行更为精确的检测。

04

PART

03

发酵工艺控制

初始含水量

控制在适宜范围内,以保证纳豆菌生长和代谢所需的水分。

接种量

根据生产规模和发酵剂特性确定,以保证纳豆菌的快速繁殖和发酵效果。

培养温度

保持在纳豆菌最适生长温度范围内,有利于发酵剂的发挥和纳豆激酶的产生。

pH值

调节至适宜范围,以维持纳豆菌的活性和代谢产物的稳定性。

固态发酵参数设置

温湿度动态监控系统

湿度监控

实时监测发酵过程中的温度变化,确保温度始终保持在适宜范围内。

数据记录与分析

温度监控

实时监测发酵过程中的湿度变化,避免湿度过高或过低对纳豆菌生长和纳豆激酶产生的影响。

自动记录温湿度数据,并进行分析和处理,以便及时调整发酵参数,保证产品质量。

根据发酵剂特性和生产工艺要求,确定合理的发酵时间范围。

发酵时间

检测发酵产物中的纳豆激酶活性,确保产品达到预期的保健效果。

纳豆激酶活性

观察发酵产物的颜色、味道、形态等感官指标,判断发酵是否充分、是否变质。

感官指标

发酵终止判断标准

PART

04

酶解提取工艺

菌体破碎技术选择

高压均质法

通过高压均质器将纳豆菌体进行破碎,使细胞内的纳豆激酶释放出来。

01

超声波破碎法

利用超声波的振动作用,破坏纳豆菌体的细胞壁,使细胞内的纳豆激酶更容易释放出来。

02

酶解法

通过加入特定的酶类,分解纳豆菌体的细胞壁,从而释放出纳豆激酶。

03

离心分离操作规范

离心速度

根据纳豆激酶的颗粒大小和离心机的性能,设定合适的离心速度,以充分分离出纳豆激酶。

01

根据离心速度和纳豆激素的含量,确定合适的离心时间,以保证纳豆激素的充分分离。

02

离心温度

离心温度要适中,避免过高或过低的温度对纳豆激酶的活性产生影响。

03

离心时间

超滤浓缩工艺要点

超滤压力

根据纳豆激酶分子量的大小,选择合适的超滤膜,以截留纳豆激酶并排出其他小分子杂质。

浓缩倍数

膜的选择

超滤过程中要控制压力,避免过高的压力对纳豆激酶的活性产生负面影响。

根据纳豆激酶的初始浓度和最终需求,确定合适的浓缩倍数,以保证纳豆激酶的含量和活性。

PART

05

精制纯化流程

离子交换层析应用

利用生物大分子与离子交换剂之间的电荷差异进行分离纯化。

离子交换层析原理

采用适宜的离子强度和pH条件,将纳豆激酶与杂质分离。

离子交换层析方法

分辨率高,可去除大量杂蛋白,提高纳豆激酶纯度。

离子交换层析优势

凝胶过滤纯化步骤

凝胶过滤原理

根据分子大小差异进行分离,大分子物质被凝胶孔径阻滞,小分子物质则通过。

01

凝胶过滤操作

选用适当的孔径大小和介质材料,将纳豆激酶溶液通过凝胶柱,收集洗脱液。

02

凝胶过滤效果

有效去除小分子杂质和盐分,提高纳豆激酶纯度和活性。

03

冻干成品制备技术

冻干技术原理

通过低温冷冻和真空升华的方式,去除纳豆激酶中的水分,保持其生物活性。

01

预冷、升华、解析等关键步骤,确保纳豆激酶在干燥过程中不受损。

02

冻干成品特点

纳豆激酶冻干后呈粉末状,稳定性好,易于储存和运输

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