Fmoc保护与脱保护.docxVIP

作为氨基和羟基的高效保护基团，Fmoc（即芴甲氧羰基）在有机合成中具有重要地位。其最显著的优势在于对酸的高度稳定性，这使得Fmoc成为多肽合成及其他复杂有机分子构建中的首选保护基团。本文将详细探讨Fmoc保护基的引入与脱除过程。

Fmoc保护基的引入

Fmoc的引入离不开两种核心试剂-即Fmoc-Cl（芴甲氧羰基氯）以及Fmoc-OSu（芴甲氧羰基琥珀酰亚胺酯）。

相较于Fmoc-OSu，Fmoc-Cl表现出更高的反应活性。然而，这并不意味着在所有情况下Fmoc-Cl都是更优的选择。对于醇类化合物而言，通常需要与活性较高的Fmoc-Cl进行有效反应；而对于氨基化合物，则可以使用活性稍低的Fmoc-OSu。在许多实际应用中，氨基与Fmoc-OSu的反应效果往往优于与Fmoc-Cl的反应。这可能是由于Fmoc-Cl的高活性容易导致不必要的杂质生成，从而影响反应的整体质量和效率。

在引入Fmoc保护基的反应中，为了中和反应过程中生成的酸，通常需要加入适量的碱。鉴于Fmoc保护基对碱敏感，在强碱条件下容易发生脱除，因此应选择相对较弱的碱。吡啶是一个理想的选择，其碱性明显弱于三乙胺等常用的有机碱，可以在反应过程中有效避免Fmoc保护基的脱除，从而减少杂质的生成。此外，碳酸氢钠或碳酸钠也可以作为碱使用，但需要引入水作为溶剂。对于与Fmoc-OSu的反应来说，水的引入可能不是大问题；但对于与Fmoc-Cl的反应而言，由于Fmoc-Cl对水敏感，水的引入可能会降低反应效率或产生副产物。因此，在使用碳酸氢钠时需谨慎考虑，以确保反应顺利进行。

例子说明

将Fmoc-Cl（31克，0.12摩尔）的二氧六环溶液（150毫升）在0℃下加入到化合物1（24.1克，0.1摩尔）的二氧六环（100毫升）悬浮液和10%碳酸钠水溶液（150毫升）中。混合物在0℃下搅拌1小时，然后在室温下再搅拌1小时。将反应混合物倒入水中，用乙醚洗涤。水相用浓盐酸酸化，沉淀出的产物经过滤分离，并在真空下干燥，得到化合物2（45克，98%）。

向3毫升二氯甲烷、6毫升饱和碳酸氢钠水溶液和1毫摩尔4的剧烈搅拌混合物中加入1.4倍当量的Fmoc-Cl。反应完成后（薄层色谱检测），加入6毫升二氯甲烷和3毫升水，分层。有机相用饱和食盐水洗涤一次，干燥（硫酸镁），然后蒸发溶剂。粗产物通过柱层析（石油醚，40-60/乙酸乙酯95/5，体积比）纯化，得到白色固体5e，产率为79%，熔点88°C。

向3-氨基苯甲酸（1.37克，10毫摩尔）的水溶液（35毫升）中加入碳酸氢钠（2.52克，30毫摩尔），将所得混合物冷却至5℃，缓慢加入Fmoc-Cl（3.87克，15毫摩尔）的对二氧六环溶液。所得混合物在0℃下搅拌1小时，然后在室温下过夜。通过预涂的薄层色谱板监测反应完成情况。反应完成后，向反应混合物中加水，水层用乙酸乙酯萃取。然后有机层用饱和碳酸氢钠水溶液萃取两次。合并水层，用10%盐酸酸化至pH值为2，再用乙酸乙酯萃取三次。合并有机层，在减压下除去溶剂，得到标题化合物。粗产物未经进一步纯化直接使用。

Fmoc保护基的脱除

脱保护试剂的效率比较

Fmoc保护基在酸性和温和氧化条件下较为稳定，而在碱性环境下则能顺利实现脱保护。以下是几种常见脱保护试剂的效率比较：

高效脱保护试剂：20%哌啶/DMF溶液。该试剂脱保护速率最快，通常在5至30分钟内完成，是多肽固相合成的标准条件。

高效且适用于碱敏感底物的试剂：Bu?N?F?/DMF体系。该体系在室温下表现出优异的脱保护效果，特别适用于对碱性敏感的底物。

中等效率试剂：浓氨水、二乙胺、乙醇胺、环己胺、吗啡啉和吡咯烷酮的50%CH?Cl?溶液。这些试剂需要适当延长反应时间（30分钟至数小时），但仍然能够有效脱保护。

低效试剂：空间位阻较大的胺类化合物，如三乙胺和2,6-二甲基吡啶。由于位阻阻碍了亲核进攻，这些试剂的脱保护效率最低。

脱保护机理与副产物

在碱性环境下，Fmoc保护基的脱保护机理如图1所示。碱性条件下，Fmoc基团通过亲核取代反应被去除，生成相应的游离氨基。然而，在某些情况下，可能会产生副产物，如N,N-二取代的副产物或消旋化现象，具体取决于底物的性质和反应条件。

图1

脱保护过程中生成的二苯并富烯及其衍生物具有很强的吸收，一般情况下可通过LCMS监测。

例子说明

在室温下，将哌啶（0.66毫升）加入到化合物1（0.797克）的甲醇（10毫升）溶液中。反应混合物在室温下搅拌18小时，然后浓缩，残留物通过氧化铝柱层析（乙酸乙酯/甲醇=10/1）纯化，得到化合物2（0.382克，7