T_NAIA 0371-2025 葡萄酒中5种羟基苯甲酸类物质的测定 高效液相色谱-串联质谱法.docxVIP

ICS67.160.10

CCSC151

T/NAIA

团体标准

T/NAIA0371—2025

葡萄酒中5种羟基苯甲酸类物质的测定高

效液相色谱-串联质谱法

Determinationof5HydroxybenzoicAcidCompoundsinWinebyLiquidChromatography-TandemMassSpectrometry(LC-MS/MS)

2025-03-10发布2025-03-31实施

宁夏化学分析测试协会发布

T/NAIA0371—2025

I

前言

本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》规定编写。

本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由宁夏化学分析测试协会提出并归口。

本文件起草单位：宁夏回族自治区食品检测研究院（国家市场监督管理总局重点实验室（枸杞及葡萄酒质量安全））、宁夏化学分析测试协会。

本文件主要起草人：汤丽华、马雪梅、岳苑、李强、朱燕燕、吕毅、王泽岚、王琛、吴明、马桂娟、张小飞。

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葡萄酒中5种羟基苯甲酸类物质的测定

高效液相色谱-串联质谱法

1范围

本文件规定了葡萄酒中5种羟基苯甲酸类物质（没食子酸、香草酸、丁香酸、对羟基苯甲酸、原儿茶酸）的液相色谱质谱检测方法。

本文件适用于葡萄酒中没食子酸、香草酸、丁香酸、对羟基苯甲酸和原儿茶酸的测定。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4原理

试样加入水，超声提取后提取液经分散固相萃取法净化，供高效液相色谱-串联质谱仪测定，外标法定量。

5试剂和材料

本方法所用的试剂，除另有规定外，均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

5.1试剂

5.1.1乙腈：色谱纯。

5.1.2甲醇：色谱纯。

5.1.3甲酸：优级纯。

5.1.4N-丙基乙二胺（PSA）粉末：粒径50μm。

5.1.50.1%甲酸水溶液：量取1mL甲酸，用水定容到1000mL，摇匀。

5.2标准品

5种羟基苯甲酸物质中英文通用名称、CAS号、化学分子式、纯度见附录A。

5.3标准溶液配制

5.3.1标准储备液（1.0mg/mL）：分别准确称取没食子酸、香草酸、丁香酸、对羟基苯甲酸、原儿茶酸标准品10mg（准确至0.1mg）于10mL容量瓶中，分别用甲醇（5.1.2）溶解并定容至刻度，4℃保存。

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T/NAIA0371—2025

5.3.2混合标准中间液（10.0μg/mL）：分别准确吸取没食子酸、香草酸、丁香酸、对羟基苯甲酸、原儿茶酸标准储备液（5.3.1）各0.1mL于10mL容量瓶中，用水定容至刻度，4℃保存。

5.3.3混合标准使用液：准确吸取混合标准中间液（5.3.2）适量，用水配制成浓度为10.0ng/mL~500.0ng/mL的混合标准工作液，临用现配。

6仪器和设备

6.1液相色谱-串联质谱仪：配备电喷雾离子源(ESI)。

6.2分析天平：感量0.1mg。

6.3涡旋混合器。

6.4超声波发生器。

6.5离心机：转速不低于8000r/min。

6.6水相微孔滤膜，孔径0.22μm，或性能相当者。

7分析步骤

7.1试样制备

取代表性样品2瓶摇匀分装，冷藏保存。

7.2试样的提取

吸取5.0mL样品，加入15mL水，涡旋混匀，超声10min，静置后取2mL加入至盛有100mgPSA（5.1.4）粉末的净化管中，涡旋5min，8000r/min离心3min，取上清液经0.22μm微孔滤膜（6.6）过滤，上机待测。

7.3仪器参考条件

7.3.1液相色谱参考条件

a）色谱柱：C18色谱柱，2.1mm×100mm，粒径1.8μm或性能相当者。

b）柱温：40℃。

c）流动相：A：0.1%甲酸水溶液（5.1.5），B：乙腈（5.1.1）；梯度洗脱见表1。

d）流速：0.30mL/min。

e）进样量：10μL。表1流动相及梯度洗脱条件

时间/min

流速/（mL/min）

流动相A/%

流动相B/%

0.00

0.30

85

15

1.00

0.30

85

15