T_NAIA 0369-2025 葡萄酒中4种羟基肉桂酸类物质的测定 高效液相色谱-串联质谱法.docxVIP

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ICS67.160.10

CCSC151

T/NAIA

团体标准

T/NAIA0369—2025

葡萄酒中4种羟基肉桂酸类物质的测定

高效液相色谱-串联质谱法

Determinationof4HydroxycinnamicAcidCompoundsinWinebyLiquidChromatography-TandemMassSpectrometry(LC-MS/MS)

2025-03-10发布2025-03-31实施

宁夏化学分析测试协会发布

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前言

本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》规定编写。

本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由宁夏化学分析测试协会提出并归口。

本文件起草单位：宁夏回族自治区食品检测研究院（国家市场监督管理总局重点实验室（枸杞及葡萄酒质量安全））、宁夏化学分析测试协会。

本文件主要起草人：汤丽华、马雪梅、岳苑、郭阳、朱燕燕、吕毅、王琛、王泽岚、吴明、马桂娟、张小飞。

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T/NAIA0369-2025

葡萄酒中4种羟基肉桂酸类物质的测定

高效液相色谱-串联质谱法

1范围

本文件规定了葡萄酒中绿原酸、对香豆酸、咖啡酸和阿魏酸4种羟基肉桂酸的高效液相色谱-质谱检测方法。

本文件适用于葡萄酒中绿原酸、对香豆酸、咖啡酸和阿魏酸4种羟基肉桂酸的测定。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4原理

试样经水涡旋振荡提取，取上清液，经分散固相萃取净化，反相色谱柱分离，以保留时间定性，供高效液相色谱-质谱仪测定，外标法定量。

5试剂和材料

本方法所用的试剂，除另有规定外，均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

5.1试剂

5.1.1乙腈：色谱纯。

5.1.2甲醇：色谱纯。

5.1.3甲酸：色谱纯。

5.1.40.1%甲酸水溶液：取甲酸（5.1.3）1.0mL，用水定容到1000mL，摇匀。

5.1.50.1%甲酸乙腈溶液：取甲酸（5.1.3）1.0mL，用乙腈（5.1.1）定容到1000mL，摇匀。

5.1.6十八烷基键合硅胶吸附剂（C18）粉末：粒径50μm。

5.2标准品

标准品：咖啡酸（Caffeicacid，CAS号331-39-5，C9H8O4），纯度≥95%；对香豆酸（p-Coumaricacid，CAS号501-98-4，C9H8O3），纯度≥95%；绿原酸（Chlorogenicacid，CAS号327-97-9，C16H18O9），，纯度≥95%；阿魏酸（Ferulicadid，CAS号1135-24-6，C10H10O4），纯度≥95%。

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5.3标准溶液配制

5.3.1标准储备液（1.0mg/mL）：分别准确称取绿原酸、对香豆酸、咖啡酸和阿魏酸标准品10mg（准确至0.1mg）于10mL容量瓶中，用甲醇（5.1.2）溶解并定容至刻度，4℃保存。

5.3.2混合标准中间液（100μg/mL）：分别准确吸取绿原酸、对香豆酸、咖啡酸和阿魏酸标准储备液（5.3.1）各1.0mL于10mL容量瓶中，用水定容，4℃保存。

5.3.3混合标准使用液：分别准确吸取混合标准储备液（5.3.2）适量，纯水配制成浓度为

20.0ng/mL~500.0ng/mL的标准工作液，临用现配。

6仪器和设备

6.1高效液相色谱-串联质谱仪：配备电喷雾离子源(ESI)。

6.2分析天平：感量0.1mg。

6.3涡旋混合器。

6.4离心机：转速不低于8000r/min。

6.5超声波发生器。

6.6水相微孔滤膜，孔径0.22μm，或性能相当者。

7分析步骤

7.1试样制备

取代表性样品2瓶摇匀，冷藏保存。

7.2试样的提取

吸取5.0mL试样于50mL离心管中，加入10.0mL水，涡旋振荡提取10min。取2mL提取液加入含有100mgC18粉末（5.1.6）的离心管中，涡旋5min，8000r/min离心5min，取上清液经0.22μm微孔滤膜（6.6）