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规模化奶牛场布鲁氏菌病净化技术规范
1范围
本文件规定了规模化奶牛场布鲁氏菌病诊断方法、净化措施、净化标准和净化维持等技术要求。本文件适用于规模奶牛场布鲁氏菌病净化，，其他类型的奶牛场布鲁氏菌病净化可参考执行。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T18646动物布鲁氏菌病诊断技术
GB19489实验室生物安全通用要求
NY/T1567标准化奶牛场建设规范
《布病防治技术规范》（农医发[2007]12号）
《跨省调运乳用种用家畜产地检疫规程》农牧发〔2023〕16号
《关于推进动物疫病净化工作的意见》农牧发〔2021〕29号
《动物疫病净化场评估技术规范（2023版）》疫控综[2023]49号
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
3.1规模化奶牛场large-scaledairyfarm
有独立封闭的饲养管理区域，占地面积依据NY/T1567，饲养规模50头以上，管理规范的奶牛饲养场。
3.2布鲁氏菌病Brucellosis
布鲁氏菌病（也称布氏杆菌病，以下简称布病）是由布鲁氏菌属细菌引起的人兽共患的传染病。世界动物卫生组织（OIE）将其列为必须报告的动物疫病，我国将其列为二类动物疫病。
3.3布病监测brucellosismonitoring
由县级以上地方人民政府农业农村主管部门组织实施，动物疫病预防控制机构按照规定的方法，对布病进行检测。
3.4布病净化brucellosiselimination
对布病流行的特定区域采取一系列措施，达到消灭或清除传染源的目的。
3.5缩略语
下列缩略语适用于本文件。
OIE世界动物卫生组织(WorldOrganizationforAnimalHealth(英),OfficeIntentionaldesEpizootic（法)
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RBT虎红平板凝集试验(RoseBengalTest)
MRT乳牛环状试验(MilkRingTest)
SAT试管凝集试验(SerumAgglutinationTest)
CFT补体结合试验(ComplementFixationTest)
iELISA间接酶联免疫吸附试验(IndirectEnzymeLinkedImmunosorbentAssay)
cELISA竞争酶联免疫吸附试验(CompetitiveEnzymeLinkedImmunosorbentAssay)
PCR聚合酶链式反应(PolymeraseChainReaction)
4布病诊断方法
4.1临床诊断
按照GB/T18646-2018《动物布鲁氏菌病诊断技术》规定的流行病学、临床症状和病理变化进行临床判断。
4.2实验室诊断
4.2.1血清学诊断
4.2.1.1血清：来自布鲁氏菌病非免疫奶牛、使用A19疫苗皮下注射接种超过18个月或使用S2疫苗口
腔喷服免疫超过6个月的奶牛。
4.2.1.2乳样：新鲜全乳或混合乳来自布鲁氏菌病非免疫奶牛、使用A19疫苗皮下注射超过18个月或使用S2疫苗口腔喷服免疫超过6个月的奶牛，不得为初乳、脱脂乳、煮沸过的乳、冻结乳、腐败乳、酸化乳、乳房炎及其他乳房疾病患病牛的乳样。
4.2.1.3病原样品：流产胎儿可无菌采集胎衣、羊水、肝、脾、淋巴结、胃内容物等；流产母牛可无菌采集乳汁、阴道分泌物等。采样过程应当采取措施防止病原扩散。
4.2.2.1血清检测：虎红平板凝集试验（RBT），试管凝集试验（SAT），间接酶联免疫吸附试验（iELISA），竞争酶联免疫吸附试验（cELISA），补体结合试验（CFT），按GB/T18646执行。
4.2.2.2乳样检测：采用全乳环状试验（MRT），按GB/T18646执行。
4.2.2.3病原检测：涂片染色镜检、分离培养、细菌鉴定、PCR检测、Bruce-ladder检测按照GB/T18646规定执行。
4.2.2病原学诊断
病原学检测方法中涉及细菌活菌操作等应在满足GB19489的BSL-3级生物安全实验室内进行，检测人员应采取针对性防护措施。
流产胎儿可无菌采集胎衣、羊水、肝、脾、淋巴结、胃内容物等；流产母牛可无菌采集乳汁、阴道分泌物等。采样过程应当采取措施防止病原扩散。
4.2.2
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