DB51_T1080-2010_饲料中玉米赤霉烯酮的测定高效液相色谱法_四川省.docxVIP

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DB51

备案号：28170-2010

四川省地方标准

DB51/T1080—2010

饲料中玉米赤霉烯酮的测定

高效液相色谱法

Determinationofzearalenoneinfeeds

High-performanceliquidchromatography

四川省质量技术监督局发布

DB51/T1080-2010

目次

前言…………………………II

1范围…………………………1

2规范性引用文件……………1

3原理…………………………1

4试剂和溶液…………………1

5仪器与设备…………………1

6试样制备……………………2

7分析步骤……………………2

8结果计算……………………2

9精密度………………………2

附录A…………………………3

I

DB51/T1080-2010

前言

本标准的附录A为资料性附录。

本标准由四川省畜牧食品局提出并归口。

本标准由四川省质量技术监督局批准。

本标准由四川省饲料工作总站负责起草。

本标准起草人：柏凡、赵立军、李云、高庆军、魏敏、张静。

II

DB51/T1080-2010

饲料中玉米赤霉烯酮的测定高效液相色谱法

1范围

本标准规定了测饲料中玉米赤霉烯酮的含量的高效液相色谱法(HPLC)。

本标准适用于配合饲料、浓缩饲料及饲料原料的测定。

本标准中检出限为0.1mg/kg。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682

分析实验室用水规格和试验方法

GB/T14699.1饲料采样

GB/T20195动物饲料试样的制备

3

原理

试样经纯水提取，离心、过滤后，取滤液经过免疫亲和柱净化，浓缩，用高效液相色谱仪-紫外检

测器检测，外标法计算玉米赤霉烯酮含量。

4.4提取液：乙腈+水=90+10（体积比）。

4.5.1标准贮备液：精密称取10mg玉米赤霉烯酮标准品，用乙腈溶解、定容至100mL，此贮备液浓

度为100μg/mL，置于冰箱中2℃～8℃保存，有效期6个月。

标准工作溶液：分别准确移取玉米赤霉烯酮贮备液，用流动相配制成标准工作溶液：0.01μg/mL，

0.1μg/mL，0.5μg/mL，1.0μg/mL，2.0μg/mL，5.0μg/mL。置于冰箱中2℃～8℃保存，有效期1个月。

注意：

1

DB51/T1080-2010

5.6高效液相色谱仪：配备紫外检测器。

5.7氮吹仪。

5.8

0.45μm滤膜。

6试样制备

按GB/T14699.1规定采集试样后，按GB/T20195规定，选取具有代表性的实验室样品1kg，四分法缩

减分取200g左右，粉碎过1mm孔筛，混匀装入磨口瓶中备用。

7

分析步骤

7.1

试样溶液的制备

7.1.1

提取

称取20g试样(精确至0.01g)于锥形瓶中，加入2g氯化钠（4.3），50mL提取液（4.4），超声提取

20min，离心，取上清液过滤，取1mL上清液用蒸馏水稀释至10mL，稀释液待净化。

7.1.2净化

将免疫亲和柱底帽除去。剪去亲和柱的盖帽，与10mL注射器连接。待免疫亲和柱中缓冲液排出后，

精确吸取上述稀释液1.0mL～2.0mL过免疫亲和柱（流速1-2滴/秒），再用5mL蒸馏水淋洗柱子，抽干柱

子，用2mL甲醇洗脱，收集洗脱液于50℃水浴中氮气吹干，准确加入流动相1000μL，涡旋30s，过0.45μm

滤膜，上机测定。

7.2色谱条件

7.2.1色谱柱：C18柱，柱长250mm，内径4.6mm，粒度5μm；或性能相当的色谱柱。

7.2.2柱温：30℃